[其他]一种生产黄单胞菌多糖的培养基

说明书

本发明属于微生物多糖工业生产方法。

微生物多糖，特别是由Xanthomonas属的一些种产生的胞外多糖，由于其结构的特殊性可广泛用于石油开发、地质钻探、消防灭火、搪瓷、轻工、食品等多个行业，具有一定的经济效益。1961年美国发表了利用Xanthomonas Campestris NRRL B-1459菌株发酵生产黄单胞菌多糖的研究报告，并于六十年代末开始工业生产，继之扩展到美国数家公司和欧洲。其发酵培养基组成为葡萄糖或淀粉水解物（2-3%）作碳源，DDS或无机氮源，K₂HPO₄和MgSO₄作为无机盐，自来水配制。在不控制PH的分批发酵中，一般多糖产量为14-15克/升，发酵液粘度为4500-7000CP。（见U，S.Patent 3，391，060、4，154，654、3，594，280）

本发明的目的在于选择一个适合工业生产并能高产的发酵培养基。

本发明的要点是利用自己筛选的Xanthomonas Campestris NK-01菌株发酵生产黄单胞菌多糖，其发酵培养基组成为2-5%的淀粉作碳源，0.2-0.4%的豆并粉和0.1-0.3%的鱼粉作氮源，0.15-0.35%的CaCO₃作无机盐，自来水配制。这些发酵原料来源广，价格低，并能给出较高的多糖产量和发酵液粘度。适合工业生产。

实施例1

由X、Campestris    NK-01菌株斜面取一环接入装有80ml培养液的250ml摇瓶中，28℃振荡培养48小时即为摇瓶种子。摇瓶种子培养基组成如下：

蔗糖    1%，牛肉膏    0.3%，

蛋白胨    0.5%，酵母膏    0.1%，

自来水配制，调PH7.0。蒸汽压1Kg/cm²，

灭菌    30′。

取1.5ml摇瓶种子接入装有60ml发酵培养基的250ml摇瓶中。发酵培养基组成如下：

玉米淀粉    4%，豆并粉    0.3%，

鱼粉 0.2%，CaCO₃0.25%，

自来水配制，调PH7.0，蒸汽压力 1Kg/cm²

灭菌    30′。

将发酵摇瓶振荡培养72小时后，发酵液粘度11000CP，多糖产量26克/升。

实施例2

取例1所述摇瓶种子3升，接入200升发酵罐中（装130升发酵培养基，其组成同例1），控制罐压0.8-1.0Kg/cm²，通风搅拌，28-30℃培养74小时，终粘度为9400CP，多糖产量24.3克/升。

实施例3

将例1所述摇瓶种子以2%的种量接入装有100升二级种子培养液的200升罐中。该种子培养基的组成是：

蔗糖    1%，蛋白胨    0.5%，

CaCO₃0.2%，自来水配制，0.8-1Kg/cm²

蒸汽压力灭菌30′。

接种后维持罐压0.8-1Kg/cm²，通风搅拌，28-30℃培养16-18小时，经检查无杂菌、菌浓合格即接入1200升发酵罐中，此罐装800升经灭菌的发酵培养基（其组成同例1），控制罐压0.8-1.0Kg/cm²，通风搅拌，28-30℃培养76小时，发酵液粘度7800CP，多糖产量22.4克/升。

参考文献

1.Adv、Appl、Microbiol、，V、23，P、19-25（1978）

2.S、P、Rogovin    et    al、，J、Biochem、Microbiol、Technol、eng、，V、Ⅲ，No、1，P、51-63（1961）

3.M、C、Cadmus    et    al、Biotechnol、Bioeng、V、××，P、1003-1014（1978）

4.M、C、Cadmus    et    al、Can、J、Microbl、V、22，P、942-948（1976）