[其他]制备与人a-心房肽有关多肽的方法

说明书

本发明涉及一类多肽，它们对于临床诊断试剂的发展和病理生理学的研究都是有用的。特别是这些多肽可用于病因诊断或用于原发性高血压这类心血管失调的病理生理学研究。

最近，Kangawa，Matsuo，等人分离出了一种多肽人α-心房肽（α-human    Atrial    Natriuretic    Polypeptide＝α-h    ANP]，它对人的心房有很强的钠尿效应，并确定了其结构由二十八个氨基酸组成，结构如下，[参考文献Biochem.Biophs.Res.Comm.118    131（1984）]：

据报导，用大鼠做生物测定α-h    ANP的利尿效应相当于曾经被作为抗高血压的利尿剂广泛使用的furosemide的一千五百倍。虽然α-hANP[下文有时用α-hANP-（1-28）表示]的一些小片段，例如，α-hANP-（7-28）[由N-末段的第七个到第二十八个氨基酸的多肽片段]，α-hANP-（13-28），α-hANP-（18-28）已经商品化了，但它们的生理学效应和作为抗原的功能还没有报导。这些多肽其中α-h    ANP-（18-28）是N-末端谷氨酰胺环化的多肽，而且α-hANP-（18-28）N-末端谷氨酰胺末环化的还没有发现。

α-hANP被认为是引起心血管疾病和原发性高血压的物质之一。本发明的目的是提供下列结构式所示的一些多肽：R-门冬酰胺-丝-苯丙-精-酪-OH，其中R是H，半胱，甘-半胱，亮-甘-半胱，甘-亮-甘-半胱，丝-甘-亮-甘-半胱，谷氨酰胺-丝-甘-亮-甘-半胱，丙-谷氨酰胺-丝-甘-亮-甘-半胱，甘-丙-谷氨酰胺-丝-甘-亮-甘-半胱，或者，异亮-甘-丙-谷氨酰胺-丝-甘-亮-甘-半胱，以及它们相应的盐，可用于制备α-hANP的抗血清，这些试剂可用于临床诊断心血管失调，或用于病理生理学的研究。

图1所示α-hANP（1-28）的标准曲线（用●-●表示），α-rANP-（1-28）的交叉曲线（用△-△表示），α-hANP-（24-28）的交叉曲线（用○-○表示），纵轴表示抗原的结合百分比（¹²⁵碘标记α-hANP）（B）游离的抗原（F）而横轴表示α-ANP的浓度（微微克/管）。

直到现在，高血压症被分成两大类，第一类与第二类高血压症。第二类高血压症主要伴随着肾脏病，内分泌疾病，怀孕，主动脉狭窄，中枢神经失调等等。另外，前者其中病因不明的作为原发性高血压症，并且80～90%的高血压症都被划分到这一类。

就第二类高血压症来说，借助于治疗有原因的病症改善高血压症的状况是可能的，然而原发性高血压症的患者已经可以得到治疗，例如用抗高血压药物，即利尿剂、血管舒张剂，肾上腺能抑制因子。不过，上文提到的α-hANP最近认为是与心血管疾病和原发性高血压症有关的制剂之一，并且广泛开展了α-hANP对高血压症意义的研究。

本发明从两个方面继续发明家们的研究，阐明α-hANP在控制水和电解质平衡中的病理生理学意义和建立一个特别的测量α-hANP的方法用于诊断和估计包括原发性高血压症在内的心血管失调。

上文后提到的测定α-hANP其测定方法的建立所必须使用的抗血清就是由本发明提供的一系列多肽来制备的。更特别地，本发明涉及的多肽可用以下通式表示：

式中R表示以下结构

H，

Cys，

Gly-Cys，

Leu-Gly-Cys，

Gly-Leu-Gly-Cys

Ser-Gly-Leu-Gly-Cys，

Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys

Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys，

Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys，

或Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys

和它们相应的盐。

所有组成结构式（Ⅰ）的氨基酸都是L-构型。以下的缩写都是根据理论与应用化学国际联合会和国际生化联合会（IUPAC-IUB）的命名法而制定的。

Ala：丙氨酸

Arg：精氨酸

Asn：天门冬酰氨

Cys：半胱氨酸

Gln：谷氨酰胺

Gly：甘氨酸

Ile：异亮氨酸