[其他]万古霉素类抗生素的固相受体分析法

权利要求书

1、测定选自万古霉素类抗生素，其个别因子、衍生物或糖苷配基、其它糖肽抗生素、以及非糖肽抗生素的被分析物(所有这些被分析物均具有结合由D-丙氨酰-D-丙氨酸二肽或D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽的“分子受体”的共同性质)的方法，其包括将已确定的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽与能够吸附于分析用“支持和/或容纳工具”表面上的大分子载体相连接，使该结合物被动地吸附于所说的表面上，同时或继后加入被试样品及已知量的被标记分析物，参照由分析已知量被分析物得到的标准曲线，计算出结合于固相体系的被标记分析物的量。

2、根据权利要求1的方法，其中D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽结合物与被分析物及被标记分析物的总量相比是有限数量的，且被试样品和已知量的被标记分析物是同时加入以吸附固相的。

3、根据权利要求1的方法，其中D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽结合物的结合位点超过被试样品的量，被试样品和被标记分析物是相继加入的，且被标记分析物的量就是其结合所说已吸附结合物的所有可被占有的结合位点数量。

4、根据权利要求1的方法，其中被分析物是选自万古霉素、teicoplanin、阿克他菌素、avoparcin、类放线菌素、LL-AM-374、A477、OA7653、A35512B、A515668、AAD216、A41030、A47934以及其个别因子、衍生物和糖苷配基的万古霉素类抗生素物质。

5、根据权利要求1的方法，其中被分析物是teicoplanin。

6、根据权利要求1的方法，其中D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽是ε-氨基己酰-D-丙氨酰-D-丙氨酸。

7、根据权利要求1的方法，其中大分子载体是一种蛋白质。

8、根据权利要求1的方法，其中大分子载体是白蛋白。

9、根据权利要求1的方法，其中分析用“支持和/或容纳工具”是微量滴定板的孔或试管，或塑料薄膜。

10、根据权利要求1的方法，其中分析用“支持和/或容纳工具”是聚乙烯或聚苯乙烯微量滴定板的孔。

11、根据权利要求1的方法，其中“被标记分析物”的标记物是酶。

12、根据权利要求1的方法，其中被标记分析物的标记物是辣根过氧化物酶。

13、根据权利要求1的方法，其包括：

a）用磷酸缓冲盐水（PBS），小牛血清白蛋白（BSA）和一种表面活性剂如聚环氧乙烷山梨聚糖一月桂酸酯（吐温20）制备pH7.0-7.5的稀释缓冲液;

b）制备溶于磷酸缓冲盐水（PBS）和稀释之血清（pH7.0-7.5）的被试抗生素的标量标准稀释液系列（包括零标准管）;

c）用上述稀释缓冲液将被试血清样品稀释到选定的稀释度;

d）将辣根过氧化物酶与被分析物的结合物加到各样品管中，混匀之;

e）将各混合物移入已用限定量BSA-ε-Aca-D-Ala-D-Ala包被的微量滴定板的塑料孔中;

f）于室温下，在湿盒中温育约2小时，用加有0.05-0.1%（v/v）吐温20的PBS（pH7.0-7.5）彻底洗各孔;

g）加入能对辣根过氧化物酶反应生色的显色底物;

h）分光光度法测定各样品的光密度;

i）以分析标准样品得到的校准曲线为据，通过内推各被试样品的竞争比例，计算出被试样品中被分析物的浓度。

14、根据权利要求1的方法中使用的分析用“支持和/或容纳工具”是以与能够吸附于其表面上的大分子载体相结合D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽包被的。

15、根据权利要求14的分析工具，其中D-丙氨酰-D-丙氨酸羧基末端寡肽是ε-氨基己酰-D-丙氨酰-D-丙氨酸。

16、根据权利要求14的分析工具，其中大分子载体是一种蛋白质。

17、根据权利要求14的分析工具，其中大分子载体是白蛋白。

18、根据权利要求14的分析工具，其中所说的工具是微量滴定板的孔或试管，或塑料薄膜。