[其他]抗尿激酶单克隆抗体,带有它的基质,其试验方法和使用它的生化试验药盒无效
申请号: | 85107184 | 申请日: | 1985-09-27 |
公开(公告)号: | CN85107184A | 公开(公告)日: | 1986-09-24 |
发明(设计)人: | 马里·鲁萨·诺里;安格劳·科蒂;阿多夫·索芬蒂尼;吉奥瓦尼·卡萨尼;弗朗西斯克·帕兰蒂 | 申请(专利权)人: | 格鲁波莱佩蒂特公司 |
主分类号: | A61K39/44 | 分类号: | A61K39/44;G01N33/53;G01N33/577;B01D15/08 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利代理部 | 代理人: | 顾柏棣,辛敏忠 |
地址: | 意大利米兰20*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 尿激酶 单克隆抗体 带有 基质 试验 方法 使用 生化 | ||
1、一种单克隆抗体,它具有如下特征:
a)其为IgGl,
b)当基本上按照Tsapis等人(Eur.J.Biochem64,369[1976]所述的方法测定时,其固定入尿激酶的亲和常数为(1.42±1.5)×107/1摩尔,
c)它结合高分子量(54000)尿激酶和/或单链尿激酶前体,而不与低分子量(33000)尿激酶结合,
d)它结合尿激酶A链的18000蛋白水解片段,
e)除了尿激酶以外,它不与血清或尿的活性内肽酶结合。
2、根据权利要求1的尿激酶单克隆抗体,其另外的特征在于:
a)它不损害尿激酶的酶学活性,
b)其等电点约为5.75。
3、根据权利要求1的抗入尿激酶单克隆抗体,其进一步的特征在于,当其与适宜的基质结合时,它能在PH4.5-8.0时,甚至在有0.5摩尔氯化钠水溶液存在时结合抗原,并在0.5-1摩尔氯化钠水溶液中于PH3.0-4.0时释放出所结合的抗体。
4、一种用于纯化人尿激酶和/或其单链尿激酶前体的免疫吸附剂,其特征在于,它是由权利要求1所述的单克隆抗体与选自琼脂糖,修饰的和活化的琼脂糖,交联葡聚糖,纤维素和羧甲基纤维素的基质相联接而制得。
5、一种用于纯化人尿激酶和/或其单链尿激酶前体的免疫吸附剂,其特征在于,它是由权项1所述的单克隆抗体与基质即琼脂糖相连接而制得。
6、一种根据权项4或5所述的免疫吸附剂,其进一步特征在于,当其用于纯化尿激酶的过程时,所获得的尿激酶具有下述特征:
a)血纤维蛋白溶解值高于130000 Iu/ml,
b)富含高分子量尿激酶和/或其单链尿激酶前体,
c)实际上不含低分子量尿激酶,
d)血纤维蛋白溶解活性/酯酶活性比大于2000,
e)实际上没有促凝血酶原激酶污染物(在浓度为200 Iu/ml时凝血活性为零)。
7、根据权项4或5的免疫吸附剂,其进一步特征在于,当其用于纯化单链人尿激酶前体时,所获得人尿激酶前体具有下述性质:
a)它是分子量为50-54000的单链蛋白质,
b)它几乎不具有酰胺基分解活性,
c)它具有高的血纤维蛋白活性,
d)它不被血浆抑制剂灭活,
e)用血纤维蛋白溶酶处理,转变成双链活性血纤维蛋白溶酶原激活剂。
8、一种从生物源中提纯分子量为54000的尿激酶或其单链尿激酶前体的方法,其特征在于将生物源或其浓缩物与权项4或5所述的免疫吸附剂在PH4.5-8.0条件下相接触,以使分子量为5400的尿激酶或其单链尿激酶前体选择性地结合在免疫吸附剂上,用PH6-8的缓冲溶液冲洗,用含有或不含有0.5-1摩尔的氯化钠水溶液(PH3.0-4.0)的洗脱溶液洗脱,将所结合的抗原从免疫吸附剂上释放下来。
9、根据权利要求8的方法,其特征在于,抗原与免疫吸附剂的结合,也可以在有浓度高达0.5摩尔的氯化钠水溶液存在时完成。
10、根据权利要求9所述的方法,其进一步特征在于,所获的尿激酶产物具有下述性质:
a)它的血纤维蛋白的溶解值高于130000 Iu/ml,
b)它富含有高分子量尿激酶或其单链尿激酶前体
c)实际上不含低分子量尿激酶
d)它的血纤维蛋白溶解活性/酯酶分解活性的比值高于2000
e)它实际上没有促凝血酶原源激酶污染物(在浓度为200 Iu/ml时凝血活性为零)。
11、一种纯化人尿激酶或其单链尿激酶前体的方法,其特征在于,使用权利要求1或2所述的单克隆抗体进行亲和层析。
12、一种纯化人尿激酶或其单链尿激酶前体的方法,其特征在于,使用权项4或5所述的免疫吸附剂进行亲和层析。
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