[其他]制备抗蠕虫疫苗的方法

说明书

本发明涉及疫苗特别是抗蠕虫疫苗的发明。

哺乳动物的蠕虫感染，尤其是寄生性线虫感染，是巨大经济损失的根源，特别是羊和牛的感染，而马、猪、山羊、狗、猫和家禽的感染也是如此。这些动物必须定期地接近抗蠕虫化学制剂的治疗以控制感染。如果蠕虫感染得不到控制，受感染动物将发病，并出现贫血，腹泻，脱水，食欲不振以及其它症状，而且有时动物会死亡。人也会受蠕虫感染。

唯一可行的控制蠕虫感染的方法是抗蠕虫化学制剂。而抗蠕虫化学制剂仅对治疗时存在的虫类起作用，因为动物经常会被再感染，所以必须定期用化学制剂治疗。有时，羊需要每三周进行一次治疗。而狗和猫则需要更频繁的治疗（每日或每隔一日）以控制犬恶丝虫或犬心虫。这是一个费钱又费力而又紧张的防治过程。由于化学制剂的普遍应用，虫类将产生抗药性，因而必须开发新的而且更有力的化学制剂，很显然一种新的探讨是非常渴望的。

抗寄生性线虫疫苗的开发将能解决许多与化学制剂治疗有关的问题。预防接种提供的防护作用可能延续很长时期-或可多于12个月。仅仅在接受接种的动物会发生作用，而且不会出现任何中毒问题和残留后遗症。在这方面有人曾做过某些接种的尝试，但成就很少，而且有些成就如在应用经辐射过的幼虫疫苗上所曾发现关于材料的有效性和疫苗的稳定性等实际问题一样，成为妨碍疫苗大规模商业开发的因子。这些试尝都是用寄生于哺乳动物的线虫进行的。

死疫苗制剂失去防护作用，认为是由于许多因素造成的。例如认为寄生性线虫具有一种排放机制，可分泌一种能抑制或调节宿主免疫机能的物质，使有效的免疫反应不能作用于天然感染。这些免疫调节物质也许存在于用于死疫苗制备的寄生性线虫的粗制品中。

其次，认为寄生性线虫对宿主改变了其抗原性状，使重要的（防护性的）寄生物抗原不能激起宿主在天然感染中强有力的免疫反应。这种现象也可出现在接种死疫苗制剂或线虫抽出物之后。第三种可能是在大多数科研中被用于抗原来源的寄生物的快速而丰富的L3发育阶段，可能不含有像L4，L5和成虫阶段的有力的防护性抗原。寄生物发育阶段的有限的有效性防碍了它作大规模疫苗的应用，即使像这些寄生性线虫是有防护性的，但除了L3阶段以外也不能容易地在试管中进行培养。

本发明是由于本发明人发现不寄生于哺乳动物的线虫也具有与已经受寄生性线虫感染或接受其抽出物接种的哺乳动物产生的抗体交叉反应的抗原而做出的。所以由一种可容易地培养而不寄生在哺乳动物的线虫生产的疫苗制剂可用于预防接种并成功的防护了寄生于该动物的线虫对哺乳动物的感染，甚至用于生产疫苗的线虫的种类与寄生物的种类可以不是同种，并且在分类上可以是其他的“目”或者甚至是不同的“纲”中。

于此公开一种抗哺乳动物寄生性线虫感染预防接种用的疫苗制剂，此外该疫苗包含一种匀浆或其抽出物，而它至少是一种不寄生于哺乳动物的线虫。

另一方面本发明提供了一种哺乳动物抗寄生性线虫感染的预防接种方法，本方法包括用有效剂量的不寄生于该类哺乳动物的线虫品种的悬浮液，匀浆或抽出物对哺乳动物的预防接种。

本发明的另一方面，疫苗制剂包括一种至少有一类不寄生于哺乳动物的线虫的悬浮液，其中的线虫已被杀死或使其失去活动能力。

本发明的疫苗制剂最好采用注射法注入哺乳动物的体内。所以，对匀浆和/或抽出物要进行消毒，例如用微孔过滤器过滤，加入抗细菌的化合物，用甲醛水溶液消毒或其它已知的方法。在线虫悬浮液中要杀死线虫时可用在技术上已熟练的已知方法，例如用甲醛水溶液杀死线虫。

疫苗制剂中的活性成分在有任何疫苗制备技术中已知的佐剂存在时也都能稀解，例如存在有铝盐沉淀物或油性佐剂例如弗劳伊得佐剂。

混入疫苗中活性成分的量分别决定于受接种动物的大小，应用的佐剂和活性成分的纯度。因而需要的剂量应在物质干重量小至10微克至50毫克之间。最佳剂量应在50微克至1.0毫克的范围内。

用于加入疫苗中的线虫的品种最好是能在试管中容易培养的。这才有可能使各种发育阶段的线虫有足够的有效数量进入商品疫苗中。很多来自成虫发育阶段的在量的方面和/或质的方面都较幼虫阶段优越。

图1说明在寄生性和自由生活的线虫之间的免疫学交叉反应性。

图1A表明接受用一种寄生性线虫-捻转血矛线虫成虫的匀浆接种的羊的抗血清与自由生活线虫匀浆的反应。

图1B表明接受用一种寄生性线虫-捻转血矛线虫幼虫的匀浆接种的羊的抗血清与自由生活线虫匀浆的反应。