[其他]利用DNA重组技术产生抑制素的方法无效
申请号: | 86103459 | 申请日: | 1986-05-05 |
公开(公告)号: | CN86103459A | 公开(公告)日: | 1987-11-18 |
发明(设计)人: | 罗伯特·格雷戈里·福拉奇;安德鲁乔治·斯图尔特;戴维·马克·罗伯逊;戴维·莫里茨·德克雷泽 | 申请(专利权)人: | 澳洲生物科技公司;蒙纳什大学;享利王子医院;圣大森特医学研究所 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;A61K37/43;A61K49/02 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 罗宏 |
地址: | 澳大利亚新南威尔*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 dna 重组 技术 产生 抑制 方法 | ||
1、一个多核苷酸序列,包括一个对抑制素的整个部分,构成部分,同类物或前体的氨基酸序列起编码序列作用的第一多核苷酸序列,一个杂化上述第一序列的多核苷酸序列,一个通过突变,包括单个或多个碱基取代,缺失,插入和逆位,与上述第一序列或杂化序列有关的多核苷酸序列或一个为多肽的整个部分,构成部分,同类物,同系物或前体表达密码的多核苷酸序列,此多肽是抑制素或是与此抑制素显示出类似免疫学或生物学活性的多肽。
2、权利要求1中的多核苷酸序列,以真正纯的形式存在。
3、权利要求1或2中的多核苷酸序列,它为抑制素的43KD亚基表达密码。
4、权利要求1或2中的多核苷酸序列,它为抑制素的20KD亚基编码。
5、权利要求1或2中的多核苷酸序列,它为抑制素的15KD亚基编码。
6、权利要求1到4中的任意一个多核苷酸序列,其中所说的抑制素选自於人或牛的抑制素。
7、权利要求1或2中的多核苷酸序列,它为图5中的-60到166氨基酸序列,图5中的-10到166氨基酸序列,图7中的1到166氨基酸序列,图7中的-61到171氨基酸序列,图7中的-10到171氨基酸序列,图7中的1到171氨基酸序列或其他的生物等同物编码。
8、一个DNA序列,实际如同前面有关图5,6,7和8中任意一个附图所述。
9、一个选择为蛋白质的整个部分,构成部分或前体编码的RNA或DNA序列的方法,所说的蛋白质是抑制素或是与抑制素显示出类似免疫或生物活性的蛋白质,该方法包括提供一个或多个序列,和决定上述序列中哪一个与一个已知的、为有这样一种活力的蛋白质的整个部分,构成部分或前体编码的DNA或RNA序列杂化;或提供一个抗血清给抑制素或其构成部分並鉴定表达抑制素的构成部分或整个部分的宿主-载体组合物。
10、权利要求9的方法,其中所说的大多数序列是牛或人的基因组DNA。
11、权利要求9或权利要求10的方法,包括下列步骤:
(a)提供许多RNA序列,其中的一个或多个为一个含有抑制素的整个部分,构成部分,同类物,同系物或前体的氨基酸序列,或为一个显示出与上述抑制素类似免疫或生物活性的多肽编码。
(b)合成与上述RNA序列相对应的DNA序列以形成DNA序列文库。
(c)将上述的DNA序列插入到自主复制的克隆载体中以形成重组体克隆载体。
(d)用步骤(c)中的重组体克隆载体转化宿主细胞。
(e)选择转化宿主细胞,为抑制素的整个部分,构成部分,同类物,同系物或前体或类似的多肽已经插入的DNA序列编码。
(f)鉴定包含在步骤(e)所说的转化宿主的克隆载体中的,已插入的DNA序列。
12、权利要求11的方法,其中上述的许多RNA序列包括人或牛的RNA序列。
13、选择一个为蛋白质的整个部分,构成部分或前体编码的RNA或DNA序列的方法,所说的蛋白质是抑制素或是显示出与抑制素有类似免疫或生物活性的蛋白质,实际上如同前述的实例。
14、一个用于鉴定抑制素RNA或DNA的探查物,它含有一个多核苷酸序列和一个标记,这个序列对至少有一部分蛋白质抑制素或有其亚基的氨基酸序列,或一种显示出类似免疫或生物活性的蛋白质,或一个与上述序列杂化的序列起编码序列的作用。
15、权利要求14的探查物,其中上述的标记是一个放射性辐射标记。
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