[其他]口服疫苗

说明书

本发明涉及通过将抗原施用于粘膜而引起血清和分泌抗体的特异刺激反应。

哺乳动物中的许多感染对它们相当有害，人们有理由为它们接种特异抗原以防止这些感染。因此，就制定了接种疫苗的方案，使哺乳动物受到一种抗原的刺激，从而产生免疫反应，并赋于动物免疫特性。

给哺乳动物施用抗原，可以通过许多常规的方法进行，包括肌肉注射（i.m.）、皮下注射（s.c.）、或通过口服给药（peros）。抗原的肌肉注射和皮下注射有一些不利之处，它需要比较专业化的技术、难于大规模进行、费用昂贵，而且无论对于免疫抗原还是对注射剂中的乳化剂都会发生若干付作用。疫苗的口服相比之下没有什么问题，但就目前为止用于口服的一些抗原来看，这种方法需要比较大的抗原量，因为实际吸收并且能刺激有效免疫反应的药量通常是很低的。因此，进行口服免疫所需的抗原量通常要远远超过体注射诱导免疫反应所需要的量。口服大量抗原以产生抗体反应还有一个主要的缺点，那就是服用大量的抗原常常导致产生身体的耐受性。（Tomasi，1980;Mowat，1985;Mowat和Parrot，1983;Ngan和Kind，1978;Hanson等人1979;Richman等人，1978;Rothberg等人，1973）

迄今为止的证据表明，总的来说，抗原在口服后被小肠吸收的机制，主要是借助于对肠腔内容物的非特异性选择进行的，这种选择是通过复盖在集合淋巴结（Peyer′s    Patches）和其他GALT（与肠结合的淋巴组织）的淋巴结上面的“M”细胞完成的。（Bland和Britton    1984）。局部淋巴细胞群落随后的致敏体作用导致产生局部IgA的免疫反应及IgG阻遏细胞的致敏，并因此抑制了血清IgG的反应（Tomasi，1980;Mowat，1985;Mowat和Parrot，1983;Ngan和Kind，1978;Hanson等人，1979;Richman等人，1978;Rothberg等人，1973）。

因此，很显然，抗原吸收的部位（不论它是通过集合淋巴结或是绒毛上皮）以及很可能抗原的服用量决定了口服抗原产生的免疫反应的形式。问题是除了霍乱毒素外是否还有任何其他的抗原，它们在口服后能够特异性地启动粘膜免疫系统和/或刺激体液的免疫反应，这些反应取决于所用剂量，而不诱发身体的耐受性以及不需要过多的抗原剂量。

考虑到这一点，我们决定研究某些粘连分子可能的潜力，它们与一些肠道病原的最初附着有关系，口服时能够刺激免疫反应。这些表面抗原使一些产肠毒的大肠杆菌菌株（ETEC）具有粘连性质，它们已被确定为是非鞭毛的丝状蛋白质附属物或纤毛（Gaastra和de    Graaf，1982）。其例子包括人类ETEC菌株的CFAI和CFAII以及动物ETEC菌株的K88，K99，F41和987P纤毛（Gibbons等人，1975;Evans和Evans，1978;Levine等人，1980;Morgan等人，1978;de    Graaf和Roorda    1982）。此外，我们还检查了其他一些蛋白质的能力，这些蛋白质在口服后对于免疫系统的启动没有明显的作用。这些抗原包括一些外源凝集素，S.typhimurium（i型鞭毛）的一种血清型抗原，没有活性的流感病毒和S.typhimurium内毒素（LPS）。将口服引起的反应与完全肌肉注射（i.m.）产生的反应相比较。

因此，这些研究的目标是要提供一种方法，改进肠胃道粘膜对免疫原或抗原的吸收，以致于有可能通过免疫原的低剂量口服产生血清和分泌抗体，从而避免大量口服导致的耐受性。

因此，本发明描述了一组分子（粘膜免疫原），它们在服用后产生的抗这些蛋白的血清抗体，能与通过肌肉注射获得的抗体水平相比拟。而且，更大量地服用这些抗原时，还同时产生抗这些免疫分子的粘膜抗体。

本发明另一方面还描述了一种方法，依靠这种方法，对口服分子产生的抗体反应可以通过同时食用一些规定食物的分子而扩大或改变。

在本发明的另一方面，描述了一个可将半抗原或蛋白质粘连到粘膜免疫原上的方法，服用这种复合物时，会导致对这种半抗原或粘连蛋白质产生抗体。

缩写

1.Ab    抗体

2.BSA    牛血清清蛋白

3.ConA    伴刀豆球蛋白A

4.DNP    二硝基苯基

5.ELISA    酶连接免疫吸附剂测定法

6.ETEC    产肠毒素大肠杆菌

7.GALT    肠连结的淋巴组织