[其他]鹿茸组织细胞培养方法无效
申请号: | 86107913 | 申请日: | 1986-11-20 |
公开(公告)号: | CN1003177B | 公开(公告)日: | 1989-02-01 |
发明(设计)人: | 高云;吴玉林;王斌;李春义;程利平;赵世珍 | 申请(专利权)人: | 高云 |
主分类号: | C12N5/02 | 分类号: | C12N5/02 |
代理公司: | 农牧渔业部专利事务所 | 代理人: | 刘军,陈如明 |
地址: | 吉林省左*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鹿茸 组织 细胞培养 方法 | ||
1、一种鹿茸组织细胞的培养方法,其特征在于所采用的培养液配方为,(1)1%MEM液69-96%、双抗1%、小牛血清3-30%、PH值6.8-7.3,(2)1%MEM液69-96%、双抗1%、鹿血清3-30%、PH值6.8-7.3;选择未分化的间充质或者前成软骨细胞,经过细胞分散处理,接入培养液(1)或(2)中,细碎粒与培养液比例为1∶50(g/ml),鹿茸细胞悬液与培养液比例为1∶25(ml/ml),置于培养瓶,在36-38℃条件下,培养14-21天,成为试管型鹿茸细胞。
2、根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于细胞分散处理是将采取的增生带组织细胞,用两把尖刃刀,在滴有血清的玻片上,对刃分割鹿茸组织,直到不能分割的细碎粒为止,或者将鹿茸组织块放入捣碎机内,加1%MEM液,其鹿茸组织块与1%MEM液比例为1∶3,开机3-5分钟,经数次捣细成细胞悬液。
3、根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于培养液1的配方为1%MEM液74%、双抗1%、小牛血清25%,PH值为7.0-7.2。
4、根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于培养液2的配方为:1%MEM液74%、双抗1%、鹿血清25%,PH值为7.0-7.2。
5、根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于细胞传代培养,先倾出原培养液,用无钙、镁去离子液(FCE)洗数次,加ATV消化,再加培养液1或者培养液2,进行分瓶培养。
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