[其他]对铜绿假单胞菌血清型具有交叉反应性和交叉保护作用的单克隆抗体

说明书

本申请是1985年12月10日提交的U.S.S.N    807394号的部分继续申请，在此声明将该申请的内容合并与此。

本发明涉及应用免疫学技术提供一种用于诊断和治疗细菌感染的新型物质，具体地讲，是关于能识别铜绿假单细胞菌（Pseudomonas    aeruginosa）多重血清型的人单克隆抗体的生产和应用。

革兰氏阴性疾病及其多数严重的并发症，如菌血症和内毒血症是造成患者高发病率和死亡率的原因。这在革兰氏阴性铜绿假单胞菌中更是如此。在最近的五十年中，这一点日益与细菌感染，特别是医院感染相联系着。

在过去几十年中，抗生素被选来治疗革兰氏阴性疾病。然而，连续的高发病率和高死亡率表明抗菌素的作用是有限的，对铜绿假单胞菌更是如此（参见Andriole，V.G.，“Pseudomonas.Bacteremia：Can    A    ntibiotie    Therapy    Iherapy    Improve    Survival？”，J.Lab.Clin.Med.（1978）94：196-199）。因此，就促使去寻找另外的防治方法。

已被考虑过的方法之一是以主动或被动免疫来增强宿主的免疫系统。例如，已经观察到用全细胞细菌疫苗或经纯化的铜绿假单胞菌的细菌内毒素对人或实验动物进行主动免疫，这就导致产生一种特异调理性抗体，该抗体主要作用于铜绿假单胞菌外层细胞膜上的脂多糖（LPS）分子中重复的寡糖单位的决定因子（参见Pollack，M，Immunoglobulins：Characteristics    and    Uses    of    Intraoenous    Preparations，Alving，B.M.and    Finlayson，J.S.，eds;pp.73-79，U.S.Department    orHealth    and    Human    Seruices，1979）。

这种抗体，不论是主动产生的还是被动转入的，在各种动物中（Pollack，supra）以及某些在人体上的初步研究中（参见Young，L.S.and    Pollack，M.，Pseudomonas    aeruginosa，Sabath，l.，ed.，pp.119-132，Hans    Huber，1980）均显示出了对铜绿假单胞菌感染的致死效应有抵抗作用。此外，这些抗体对患铜绿假单胞菌菌血症的患者具有非常重要的一种作用是在于发现了对感染菌LPS分子的抗体在存活和高急性血清效价之间的关系。（参见Pollack，M.，and    Yong，L.S.，J.Clin    Invest.，63：276-286，（1979）]。

以上的报告指出免疫治疗方法可以用来防止和治疗归因于铜绿假单胞菌的细菌性疾病，如施用收集的含有抗感染菌抗体的人免疫球蛋白。在此处定义的人免疫球蛋白是指人血浆经分部后富含抗体的部分，其中存在着对铜绿假单胞菌菌株为特异性的抗体。由于在使用人免疫球蛋白成分时所固有的某些限制，使得治疗归因于铜绿假单胞菌的疾病的方法仍处于研究阶段[见Collins，M.S.and    Roby，R.E.，J.Med，76（3A）：168-174），（1984）]，而且迄今还没有利用这些成分的市售产品。

免疫球蛋白组合物所具有的这种限制之一是它们要收集数千或更多的供者的样品，这种样品是经预先确定含抗假单胞菌一抗体的样品。这种收集方式导致单个抗体效价的平均化，其结果最多只能使所需抗体的最终效价略有提高。

另外的限制是预选的过程需要花费巨大的连续地筛选供者以保证产品的一致性。除此以外，每批的免疫球蛋白产品仍含有相当大的差异，而且各地理区域的产品之间也会不同。

免疫球蛋白组合物所固有的另一限制是，在使用时要同时辅以大量的体外的蛋白质（它们可能含有病毒，如最进表明的结合有爱滋病的蛋白），这些蛋白含有造成生物学副作用的潜在性。低效价的所需抗体与大量的体外蛋白质的结合会限制适用水平，特异性物质的含量以及供给患者的有效免疫球蛋白量。