[发明专利]生产新的细胞生长调节因子的方法

权利要求书

1、一种制备多肽物质制瘤素M的方法，该多肽能够抑制赘生性细胞的增生，刺激正常人成纤维细胞的增生，不抑制人的增生和细胞毒性T细胞反应，以及不抑制粒性白细胞的髓细胞的骨髓集落细胞形成，其分子量的范围采用凝胶排阻层析法测定为17-19kd之间，采用SDS-聚丙烯酰酰凝胶电泳法测定时为28kd，它对中等强度的酸、碱以及56℃的热处理不敏感，它包括与下图所示的顺序相符合的氨基酸顺序：

1       5         10        15        20

A-A-I-C-S-C-S-K-E-Y-R-V-L-L-C-Q-L-Q-K-Q

        25        30        35

T-D-L-M-Q-D-T-S-T-L-L-T-P-Y-I

1       5         10        15       20

Q-R-L-P-K-A-Q-D-L-E-R-S-G-L-N-I-E-D-L-E-K

1       5         10        15        20

L-R-E-H-C-R-E-R-P-G-A-F-P-S-E-Q-Q-L-I-G

其特征在于该方法包括：

在常规的带有血清的培养基中培养U937，并用佛波醇或巨大戟二醇进行诱导处理3-6天；

离心后用无血清的培养基洗涤细胞2次，然后再培养12-48小时；

离心收集上清液，反复用空心纤维系统或超滤膜，然后用乙酸进行稀释后浓缩；

使浓缩物冷冻干燥。

2、一种制备多肽物质制瘤素M的方法，该多肽能够抑制赘生性细胞的增生，刺激正常人成纤维细胞的增生，不抑制人的增生和细胞毒性T细胞反应，以及不抑制粒性白细胞的髓细胞的骨髓集落细胞形成，其分子量的范围采用凝胶排阻层析法测定为17-19kd之间，采用SDS-聚丙烯酰酰凝胶电泳法测定时为28kd，它对中等强度的酸、碱以及56℃的热处理不敏感，它包括与下图所示的顺序相符合的氨基酸顺序：

1  5  10  15  20

A-A-I-G-S-C-S-K-E-Y-R-V-L-L-G-Q-L-Q-K-Q

25  30  35

T-D-L-M-Q-D-T-S-T-L-L-T-P-Y-I

1  5  10  15  20

Q-R-L-P-K-A-Q-D-L-E-R-S-G-L-N-I-E-D-L-E-K

1  5  10  15  20

L-R-E-H-C-R-E-R-P-G-A-F-P-S-E-Q-Q-L-I-G

其特征在于该方法包括：

在RPMI-1640培养基中培养PBL细胞，并用1-5mg/l植物血球凝集素处理约100小时;

收集上清液，使上清液离心以除去细胞并通过超滤或渗析进行浓缩;

使浓缩物冷冻干燥。