[其他]抗黑素瘤疫苗

说明书

本发明是一个在接种者体内诱导免疫应答选择性杀伤黑素瘤细胞的疫苗体系。相应地，通过重组DNA技术和/或化合成方法大量生产与黑素瘤相关抗原有关的肽或蛋白质。本发明的肽或蛋白质可被用作疫苗配制中的免疫原。在特定实例中这种与黑素瘤相关抗原有关的肽或蛋白质由一重组病毒表达，该重组病毒本身也可用作疫苗配制中的免疫原。本发明还提供了应用重组DNA技术以及化学合成方法大量生产与黑素瘤相关抗原有关的肽或蛋白质的工艺。

本发明用采用P97肽作为免疫原的例子说明，P97是一单节显性细胞表面唾液糖蛋白，分子量略低于97，000道尔顿，是黑素瘤细胞表面成份。

2

2.1    癌相关抗原

用实验动物（特别是啮齿类）研究表明，由致癌病毒引起的大部分癌症表达由该病毒基因组编码的抗原，带有这些抗原的免疫可导致抵制对于由同一病毒诱导的癌细胞随后发生的用接触性传染物所进行的免疫性试验。尽管大部分工作是用实验室病毒品系来做的，如SV40，多形瘤病毒，Friend病毒，Moloney病毒，或Rauscher鼠白血病毒，天然致癌病毒的横向和纵向传染也已被证明。实际上抗病毒诱导的猫白血病和肉瘤的商品化疫苗现在已可获得。

与此相反，许多人类癌症的病毒病原学尚未研究。值得注意的是肝炎病毒（肝癌），疱疹单性病毒（颈癌），以及Epstein    Barr病毒（鼻咽癌）除外。然而，在过去二十年中已证实，一些人类癌细胞表达癌抗原（即那些区分癌细胞和正常细胞配对物的抗原）;一些病人具有对抗这些抗原的细胞介导的或体液的免疫应答（Hellstrom    et    al，1968，Nature，220：1352;Morton    et    al，1968，Science    162：1279-1281;Shiku    et    al，1976，J.Exp    Med：144：873-881）。这些免疫应答的靶有一些是人类基因组编码的癌胎抗原或分化抗原。（Hellstrom    et    al，1970，Int，J    Cancer    6：346-351）。

直到最近该癌抗原的分子特性仍未知，对癌的免疫反应的特异性程度也不清楚。试图将这些信息应用于癌的诊断或治疗方面的尝试大都失败了。由于自发癌退化极罕见，人们可以得出这样的结论：在体外证明了的免疫应答在体内是无效的;例如，从癌症患者身上得到的抗体和淋巴细胞可能在体外能有效地杀死癌细胞，可是在体内同一癌症患者的免疫应答是无效的。

Kohler和Milstein引入单克隆抗体技术（1975，Nature    256：495-497）导致了对于人类癌症抗原的深入研究，因为它提供了在分子水平及特异性方面确定某抗原的工具。（Hellstrom    and    Brown，1979，In“The    Antiqens”，M    Sela，ed，Academic    Press，Vol，V：1-66），在过去的几年内已描述了大量癌相关抗原，其中大部分由小鼠单克隆抗体所确定。（Reisfeld    and    Sell，eds，Monoclonal    Antibodies    and    Cancer    Therapy，UCLA    Symposia    on    Molecular    and    Cellular    Bioloqy，New    Series，Vol，27，Alan    R·Liss，Inc，New    York，1985，PP·1-609）尽管实际上这些已确定性质的抗原证明是癌胎抗原或分化抗原，它们对于癌的特异性已发现是定量的而不是定性的，但有几种抗原对肿瘤细胞与正常细胞极为特异（对肿瘤细胞的特异性一般是对正常细胞特异性的10～1000倍），它们被用作鉴定癌细胞及治疗的潜在的靶。已得到了癌症抗原的人类单克隆抗体（Cote    et    al，1983，PrOc，Natl    Acad    Sci    80：2026-2030）。这就支持了前面提到的事实：一些癌症患者对他们的癌症具有免疫反应，现已鉴定的癌相关细胞表面抗原中一大部分是由人类基因组编码的蛋白质或糖蛋白（而不是由内源或外源病毒编码），其余为糖脂，是糖基转移酶不正常表达或调控的结果。

2.2    黑素瘤相关P97抗原