[其他]真菌检测

说明书

本发明涉及动物和人体组织及体液中真菌和藻菌的检测方法，含适用于该法的萤光增白剂的制剂，和实施该方法的试验箱。

准确诊断动物和人体感染的原因，在选择合适的治疗方法时至关重要。对于可靠的诊断来说，最好的方法是从临床标本中分离出感染的病原细菌，并进行形态学鉴定。不过，由于分离复杂，加上鉴定又常常不确切，这样一种理想情形很少能实现。即使是真菌感染的试验性诊断，也需要对组织标本或体液进行全面检查，例如使用一系列选择性地识别某些真菌抗原的不同抗体的血清学试验。

现在，对快速和可靠的诊断已有了广泛和迫切的要求，以便能够取代复杂而又费时的血清学试验，或者至少使它们局限在下述情况，即必须提供引起感染的真菌的属的准确信息。例如手述过程中对一些组织物的检查，用于分析真菌引起的排出物的妇科化验标本的检查，在可疑性皮真菌病例中皮科化验标本的检查，儿科化验标本物料和来自新生儿及粘膜上患有一般感染和可疑性霉菌病的虚弱儿童的其它待检物质的检查，例如儿童中白血病性贫血和其它肿瘤疾患中念珠菌引起的口腔和咽粘膜及食管和气管粘膜鹅口疮的检查。快速诊断对内科、肿瘤科，外科临床中检查来自可疑性高几率的真菌感染病人的组织物质也是重要的，例如，在识别爱兹病人的病例中，特别是识别食管炎和支气管炎型的念珠菌病;在用细胞抑制剂治疗肿瘤疾患的病例和使用抗菌素和/或免疫抑制剂治疗的病例的检查中;以及在可疑性霉菌病例特别是念珠菌病;在粘膜鹅口疮;在老年医学中，当检查抵抗力低下引起的皮肤和/或粘膜扩散性霉菌病的病人时，和藻菌引起可疑性的皮肤及器官感染的病例，例如Protothecosis，也是重要的。

在家蓄和爱蓄的治疗中，真菌病的诊断也是重要的，例如在研究牛乳腺炎和狗、观赏鸟类、稀有珍贵动物的真菌病时。在实验动物中，例如用人工诱发的真菌感染的小鼠和大鼠以试验潜在的抗真菌治疗剂时，简单而又可靠的鉴定真菌的方法也是重要的。

本发明现在提供了这样一个对真菌感染的快速而又可靠的诊断。本发明涉及到检测真菌和藻类的方法，该法的特征在于，动物或人体组织或体液用至少含有四个磺基的二苯乙烯萤光增白剂或其盐处理，并用萤光显微镜检查。

萤光增白剂是无色或轻度有色的有机化合物，吸收紫外光，例如吸收波长为340nm至400nm的紫外光，并以可见光例如波长为400nm至440nm的可见光的形式再次释放吸收的能量。好的萤光增白剂可用高的量子产额来鉴识。萤光增白剂属于，例如二苯乙烯类、香豆素类和喹诺酮类化合物、1，3-二苯基-2-吡唑啉类、萘二甲酰亚胺类，或苯并恶唑基化合物，或其它芳香杂环取代的芳香化合物或乙烯化合物，而且总是具有共轭的电子体系。

本发明中的萤光增白剂属于取代的二苯乙烯类，并含有至少四个，例如四至六个磺基。这些磺基为萤光增白剂带来了好的水溶度。至少含有四个磺基的该萤光增白剂及其盐的制备方法是已知的，并在例如综述和专著中比如“Fluorescent    Whitening    Agents”（editors    R.Anliker    and    G.Muller，Georg    Thieme    Verlag，Stuttgart    1975）中已有描述。

含至少四个磺基的二苯乙烯萤光增白剂的例子是通式（Ⅰ）和（Ⅱ）的化合物：

在（Ⅰ）中R¹代表至少含有一个磺基的芳香的或芳香杂环取代基，例如取代的苯基、吡啶基或三唑基，例如磺基取代的4-苯基-1，2，3-三唑-2-基;或代表被至少含有一个磺基的芳基或芳香杂环基取代的氨基，例如取代的三嗪基氨基，比如至少含一个磺基的2，4-二取代的1，3，5-三嗪基-6-氨基;而且两个R¹基可以相同或不同;

在通式（Ⅱ）中，A代表磺基取代的1，4-亚苯基或4，4′-联亚苯基;R²代表磺基、羟基、低级烷氧基，例如甲氧基，羟基-低级烷氧基，例如2-羟基乙氧基、囟素，例如氯、氰基、羧基、低级的烷氧羰基，例如甲氧羰基或乙氧基羰基，或者氨基甲酰基，或具有R¹的含义，而且R²可以相同或不同，另外也可以出现多次。

低级烷基或低级烷氧基中的低级烷基具有1至7个碳原子，最好具有1至4个碳原子，例如为甲基、乙基、丙基、异丙基或丁基。苯基、吡啶基、三唑基或三嗪基上的取代基最好是，例如后面提到的R的基团。

盐最好是水溶性盐，例如碱金属盐。象钠盐或钾盐，但也包括铵盐。

本发明的方法中较好的萤光增白剂的通式是：