[其他]蛋白质及其制备方法，ADN的顺序，抗体及其用途，痘病病毒，被转化或感染的细胞用于预防血吸虫病的药剂组合物，以及作为谷胱甘肽-S-转移酶活性的显示剂的用途

说明书

本发明涉及制备抗血吸虫病的疫苗。

血吸虫病（或者住血吸虫病）是遍及热带和亚热带地区的危害人类的寄生虫所造成的疾病（除了北美地区以外），这种疾病同样蔓延到北非洲，並在埃及严重扩延在西班牙和葡萄牙也有所发现。

这种疾病影响了世界上2-4亿的人口，能造成血吸虫病的寄生虫是形状较小的扁平的蠕虫，其中通过淡水软体动物作为中间宿主以进行其生命的再生循环。由此可见，这种疾病能随着热带地区开发灌溉渠网和河坝而扩延。

我们知道造成人类血吸虫病的病原体有五种：最广泛流行的是曼蚊血吸虫病（S.mansoni），它一般在非洲和美洲蔓延;还有两种，即住血吸虫病（S.haematobium）和插入血吸虫病（S.intercalatum），它们一般多发现于非洲;另外的两种是日本血吸虫病（S.japonicum）和湄公血吸虫病（S.mekongi），一般多发现于亚洲。

我们有必要了解和掌握寄生虫的生活习性，以便能制定防止这种疾病的整体战略。

实际上，寄生虫几乎完全适应宿主的天然防御：当其成年时，它能完全躲避免疫机构，並在靠近肠壁的血管或膀胱中生存5-20年（指曼蚊血吸虫或住血吸虫）寄生虫在人体中不再生繁殖，但雌虫每天能产下3000个卵。这些虫卵和寄生虫新陈代谢的排泄物不断出现于宿主的循环机构中，从而导致各种紊乱（肠系统紊乱，输尿系统紊乱，全身虚弱，贫血，肉芽肿及毛细血管堵塞，从而导致组织的纤维织炎和严重的肝炎）。

具有距的这些卵能穿透肠壁和膀胱壁，並在其中造成了微小的损伤，然后被排泄出去。如果它们能较快地接触到水，它们就在水中变成纤毛幼虫（纤毛蚴），並在水中游动直至穿入软体动物内。在这中间宿主中，幼虫继续不断地进行无性繁殖，生产出能在水中自由游动的许多尾蚴（被单个纤毛蚴染污的软体动物，在8-10个月生存期中能生产出50000以上的尾蚴）。

尾蚴是只能生存1-2天的浮生幼虫，当它迂到哺乳动物，尤其是人体时，能穿透皮肤。在皮肤中，它能转变成血吸虫蚴体，即未成熟的寄生虫，然后随着人体的血循环相继地传到心脏、肺，並最终达到肝脏，就是在肝脏循环系统中这些蚴体变成了成虫。雄虫与雌虫在其中交配，雌虫定居于由雄虫的躯体合拢所构成的沟渠中，这对雌雄结合体最终定居于人体腹部的血管中，其中雌虫开始产卵了。

使血吸虫蚴体完全成熟变成一个成虫，需要半个月的时间。在成虫阶段，寄生虫是吸附在宿主的分子表面上，借助这种掩敝，使它能逃躲免疫的识别和保护机构。此外，寄生虫本身分泌出能够抑制免疫的物质。每一对血吸虫在其宿主中能生存若干年，並且每天能产下数以千计的虫卵。

现有一种抗成年寄生虫的有效药物，即吡喹酮，但是其价格太昂贵，以致于不可能考虑在发展中国家普遍使用之。而且这种药也不能作为防止再传染的预防药。然而，在病染地区，当地居民则往往是接触到受这些幼虫染污的水。

因此，预防这种疾病的最大希望只能寄托在制备能抗未成年寄生虫，即血吸虫蚴体的有效疫苗上。这种疫苗应该可用于儿童以预防初级传染，並且能用于已染上疾病，並用吡喹酮药治疗过的病人，以避免再次被传染。

这种疫苗应该包含一种或多种重要的血吸虫蚴体的抗原，而且应能诱导一种有效的免疫反应，以使幼虫在未逃躲宿主的保护机构前能被治住。

当前的研究工作（请阅1985年的Capron和Dessaint评论）能够鉴别出数量有限的出现在寄生虫及其幼虫表面上的蛋白质抗原，而且它们在诱导免疫性反应方面扮演了重要的角色。

1985年Balloul等人阐明了其中之一的上述抗原：在用由凝胶提纯的曼蚊血吸虫病提取物对老鼠实施免疫以后，诱导抗体能识别出一种被称作P28的28Kd抗原，它是出现在寄生虫的幼虫和成虫上。这些相同的抗体能识别活体外的寄生虫的RNA_m提取物的转译产物和血吸虫蚴体中被标记为1¹²⁵I的一个外蛋白质。

这些抗体，抗-P28虽然本身不能中和血吸虫蚴体，但能激活细胞毒的细胞反应，从而能杀死血吸虫蚴体。

把提纯的蛋白质P28接种到试验用的大鼠和小鼠身上。这些免疫过的动物，在试验过程中具备高度的保护作用，以抗血吸虫蚴体的传染（Balloul等人，1986年）。

上述试验表明了抗原P28具有重要的诱导保护性免疫反应的作用。

本发明涉及CADN顺序的鉴别和测定，该顺序是为抗原P28或至少为一个多肽密码的，该多肽包含P28的抗原决定基，这些抗原决定基被用于抗天然的蛋白质P28的抗体所识别。