[其他]合成和分离肽的酶膜方法无效
申请号: | 87106791 | 申请日: | 1987-08-18 |
公开(公告)号: | CN87106791A | 公开(公告)日: | 1988-05-04 |
发明(设计)人: | 圭荚尔莫·A·亚科布奇 | 申请(专利权)人: | 可口可乐公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12P13/04;C12P13/22;C12N9/50;C12N9/56 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 杨九昌 |
地址: | 美国佐*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 分离 方法 | ||
1、一种肽的酶合成方法,包括以下步骤:
带有α-羧酸酯基团的一种N-酰基-β-取代的-L-天冬氨酸和带有α-铵基团的一种苯丙氨酸低级烷基酯,在含有缩合酶的含水反应混合物中缩合,形成N-酰基-L-天冬氨酰-(β-取代的)-L-苯丙氨酸低级烷基酯,一种不带电的肽;
从含水反应混合物中穿过离子排斥膜运载不带电的肽到产物混合物。
2、根据权利要求1的方法,其中缩合酶是在PH值范围约为4.0到9.0中的一种可以产生蛋白酶活性的肽。
3、根据权利要求2的方法,还包括将产物混合物中的不带电的肽转变成一种不能穿过膜逆向渗透的物质。
4、根据权利要求3的方法,其中不带电的肽用一种酯酶解离转变成一种带电的物质。
5、根据权利要求4的方法,其中酯酶是在PH值约为6.0到9.0范围内起活性作用。
6、根据权利要求4的方法,其中酯酶选自酰化氨基酸水解酶I,α-胰凝乳蛋白酶,枯草杆菌蛋白酶A。
7、根据权利要求4的方法,其中酯酶为酰化氨基酸水解酶I并且反应混合物的PH约为7.0。
8、根据权利要求3的方法,其中膜是一种通过在微孔板上细孔中的毛细作用固定的与水不相混溶的有机液体,该有机液体是不带电二肽溶剂。
9、根据权利要求8的方法,其中微孔板选自聚四氟乙烯和聚丙烯材料制成并且有机溶剂至少是一种选自正-1-癸醇、正-十六醇、正-十二醇、N,N-二乙基-十二酰胺、十二烷、2-十一烷酮的化合物及混合物。
10、根据权利要求8的方法,其中微孔板是聚丙烯空心纤维并且溶剂是N,N-二乙基-十二酰胺和十二烷。
11、根据权利要求8的方法,其中膜是一种Bend2型空心纤维选择性的通透膜。
12、根据权利要求3所说的方法,其中第一种化合物是D,L-苯丙氨酸甲酯,第二种化合物是具有α-羧酸酯基团的N-酰基-β-取代的-L-天冬氨酸。
13、根据权利要求12的方法,其中N-酰基团选自φCH2OCO-,CH=0和φCH2CO;β-取代基选自φCH3O-,叔-丁氧基(ter Buo-)、CH3O-、NH2-。
14、根据权利要求3的方法,其中缩合酶被固定。
15、根据权利要求14的方法,其中缩合酶是嗜热菌蛋白酶,反应混合物PH值约为7.0。
16、根据权利要求14的方法,还包括从反应混合物中穿过离子排斥膜运载不带肽前,将反应混合物PH值调到约5.0步骤。
17、根据权利要求3的方法,还包括分离共渗透离子排斥膜进入产物混合物的N-酰基-β-取代-L-天冬氨酸的步骤。
18、根据权利要求3的方法,还包括分离共渗透离子排斥膜进入产物混合物的苯丙氨酸低级烷基酯的步骤。
19、一种肽的酶合成方法,包括以下步骤:
带有α-羧酸酯基团的一种N-酰基-β-取代的-L-天冬氨酸和带有α-铵基团的一种苯丙氨酸低级烷基酯,在含有缩合酶的含水反应混合物中缩合,形成N-酰基-L-天冬氨酰-(β-取代的)-L-苯丙氨酸低级烷基酯,一种不带电的肽;
从含水反应混合物中穿过离子排斥膜运载不带电的肽到产物混合物;
将产物混合物中的不带电肽转变成经过膜不能逆向渗透的物质;
从产物混合物中去除经过膜不能逆向渗透的物质。
20、根据权利要求19的方法,它还包括分离共渗透离子排斥膜进入产物混合物的N-酰基-β-取代的-L-苯丙氨酸的步骤。
21、根据权利要求20的方法,它还包括分离共渗透离子排斥膜进入产物混合物的苯丙氨酸低级烷基酯的步骤。
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