[发明专利]花粉介导的植物的转化

权利要求书

1、一种培育经遗传转化的植物系的方法，其特征在于所说的方法包括以下步骤：

制备包含编码区和能有效地在植物细胞中表达编码区的侧翼调节顺序的外源基因的拷贝；

将外源基因的拷贝连接在生物学惰性的载体微粒上；

用物理方法使带有嵌合基因拷贝的微粒向植物的花粉加速，以这种方式使一些微粒射入一些花粉的内部；

用经上述处理的花粉给植物的雌性器管授粉；以及

在这种授粉所产生的后代中筛选出已转化的后代。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所说的生物学惰性的微粒是金属微粒。

3、根据权利要求2所述的方法，其特征在于所说的金属微粒是金小球。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所说的方法在将嵌合基因拷贝连接在金属微粒上之前还包括用包覆剂涂覆金属微粒的步骤。

5、根据权利要求4所述的方法，其特征在于所说的包覆剂为聚赖氨酸（Polylysine）。

6、根据权利要求4所述的方法，其特征在于所说的将外源基因拷贝连接到金属微粒上的步骤包括干燥微粒上基因拷贝的溶液。

7、根据权利要求6所述的方法，其特征在于所说的基因拷贝溶液包括与基因拷贝一起沉淀在金属微粒上的CaHPO₄。

8、根据权利要求1所述的方法，其特征在于以物理方法加速微粒的步骤包括使微粒在平面承载板上成层，通过冲击波冲击承载板使其加速以及这样限止承载板，以致载体微粒的动量使其离开所说的板。

9、根据权利要求8所述的方法，其特征在于冲击承载板的冲击波是由经水滴搭桥的火花间隙高压放电产生的。

10、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所说的使微粒向植物花粉加速的步骤包括把单层花粉铺设在靶表面上及把靶表面设置在载体微粒的加速通道中。

11、根据权利要求10所述的方法，其特征在于把花粉铺设在靶表面上是通过把一层矿物油施加在靶表面上，把花粉撒在其上以及去除多余的花粉来实现的。

12、根据权利要求1所述的方法，其特征在于给植物雌性器官授粉的步骤是通过用刷子从靶表面刷下微粒已被加速进入其中的花粉及把那种花粉撒在经选择的母本植物的雌性器官上来实现的。

13、根据权利要求1所述的方法，其特征在于在后代中的筛选是在生化试验基础上进行的。

14、根据权利要求13所述的方法，其特征在于所说的试验是抗菌素抗性试验。

15、根据权利要求1所述的方法，其特征在于在后代中的筛选是在植物形态特征基础上作出的。

16、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所说的植物是玉米。

17、根据权利要求1所述的方法培育已遗传转化的玉米植物的方法，其特征在于所说的方法包括以下步骤：

用物理的方式把包含编码区和合适的调节顺序的外源基因注入父本植物的玉米花粉中;

用手把花粉授于母本植物的成熟玉米穗丝上及把穗丝同其它花粉源隔离开;

培育从经授粉的母体植物中产生的后代。

18、一种用于把带有DNA的载体微粒注入活细胞的装置，其特征在于所说的装置包括：

电火花放电室;

伸入所说的火花放电室并由火花间隙隔开的两根电极，所说的电极适用于连接在高压放电的外电源上;

以可垂直移动的方式在火花放电室上间隔设置的承载板，所说的承载板其上接受载体微粒;

在承载板上应有位置上固定的保持筛，以及

在保持筛上间隔设置的靶表面，所说的靶表面带有细胞，以便在放电室中产生冲击波的火花放电将使承载板向保持筛加速，以致使载体微粒加速进入靶表面的细胞中。

19、根据权利要求23所述的装置，其特征在于所说的装置还包括在电极之间搭桥间隔的水滴。

20、根据权利要求23所述的装置，其特征在于所说的装置还包括包围所说装置的真空室，以便使所说的装置在部分真空中工作。

21、根据权利要求23所述的装置，其特征在于电极之间的电火花间隙为大约1毫米到大约1.5毫米。

22、根据权利要求23所述的装置，其特征在于所说的装置还包括设置在火花放电室之上的间隔圈，但它低于承载板且在其顶上至少具有局部开口。