[其他]酶活力测定仪

说明书

本实用新型所涉及的是一种改进的酶活力测定仪，特别是一种以动力学方法测定酶反应的电化学分析仪器。适用于测定多种酶系的活力。

国内，目前是采用常规比色法来检测酶的活力。该方法从三、四十年代沿用至今，缺点是：（1）时间长，如检测糖化酶活力，时间长达一小时左右；（2）成本高，由于测试中需用多种试剂，其发色剂价格比较贵，导致了成本高；（3）手续繁复，对样品必须进行预处理；（4）精度低，由测试者凭经验目测来决定滴定终点，增加了测试误差。

为了解决上述问题，日本专利申请昭58－183089、昭58－183090提出了使用多只反应池，采用酶膜电极参加反应和附加电脑校正系统的酶活性测定装置。由于酶很容易失活，采用此装置时电极表面的酶膜需经常更换，造成操作不方便。由于装置中使用多只反应池，测试中进行多次反应，所以需要附加电脑系统进行对比校正，使得整个仪器的制造难度大、造价比较高。另外该装置采用计流器记录电流变化，灵敏度比较低。

本实用新型的目的是要解决上述问题，提供一种改进的酶活力测定仪，它不仅能够方便、迅速、精确地测出酶的活力，而且结构简单、造价低廉、特别适合我国国情，便于推广应用。

本实用新型是通过以下方式实现的：

（一）在化学反应部份中，用铂丝电极代替酶膜电极。

（二）在检测部份中采用微恒电流装置，记录电压的变化，代替恒电压记录电流的变化。

（三）用一个反应池取代多个反应池或反应池组。

由于用铂丝电极代替酶膜电极，从根本上避免了酶失活的问题，使测试后对电极的处理变得极为简单方便，只要用去离子水冲洗干净即可反复使用。既提高了测试稳定性又提高了使用寿命。由于采用铂丝构成电极，反应池可以压缩到仅用一只，缩短了测试时间，减少了所用试剂的品种，同时省掉了对比、校正系统，使整个设备结构简单、造价低。由于在检测系统中，用微恒电流装置记录电压变化来代替恒电压记录电流变化，提高了测试灵敏度。

下面结合附图详细介绍本实用新型的测试实例：

图1是本实用新型实施例示意图，其中，

1——铂对电极        2——甘汞电极        3——接触温度计        4——反应池        5——搅拌棒        6——恒温池        7——恒温磁力搅拌器        8——电流表        9——数字显示        10——调零        11——电流        12——测量        13——显示        14——电源开关        15——记录仪。

图2是所举实施例的标准曲线。

图3是所举实施例的记录仪测绘图。

1、试剂的配制：

（一）胆碱脂酶（简称chE）标准液：称取chE1毫克溶于10毫升PH值为7.4    0.1M的三羟甲基氨基甲烷（简称Tris）盐酸（Hcl）缓冲液的容量瓶中（即浓度为0.1毫克／毫升或0.4活力单位／毫升），冷藏。

（二）硫代乙酰胆碱碘化物（基质）简称Acschl溶液：精确称取Acschl100毫克溶于10毫升PH7.4    0.1M    Tris－Hcl缓冲液中，即基质液浓度10毫克／毫升，冷藏。

（三）PH7.4    0.1M    Tris－Hcl缓冲液：称取三羟甲基氨基甲烷12.1克溶于去离子水中，用1NHcl调节PH到7.4，然后用去离子水稀释至1升，冷藏。

2、标准曲线的绘制：

参照图1，在反应池中加入11.5毫升Tris－Hcl缓冲液和1毫升基质液（10毫克／毫升），插入三电极系统（铂对电极和217型饱和甘汞电极），于电磁搅拌下控温于31±0.5℃，接通电源，调微恒电流为25μA并连接记录仪，使记录笔处于中心位置，此时显示器表示（0.45V左右），调纸速为6000mm／小时，此时记录纸上绘出一直线，数秒钟以后，分别加入20、40、60、80、100微升chE标准液，作切线分别记录△E和△t值（见图3），以△E／△t比值为纵座标，chE浓度为横座标，绘制标准曲线（见图2）。

3、样品的测试：

在反应池中加入11.5毫升PH7.4    0.1MTris－Hcl缓冲液和1毫升基质液，插入三电极系统，操作步骤均同绘制标准曲线一样，此时记录纸上绘出一直线。数分钟后，加入0.2毫升抗凝血样，即刻在记录纸上绘出一曲线（见图3），通过作图得出△E／△t＝1.75毫伏／秒，从图2中查得chE浓度为0.011毫克／毫升，（0.044活力单位／毫升）。