[发明专利]新抗菌素蜜环菌酸的制取方法

说明书

本发明是属于从人工发酵生产的蜜环菌丝体中提取分离新抗菌素的方法。

已知美国人S.L.Midland等在《Tetrahedron Lett.》1982年，23卷，2515页发表了从人工发酵生产的蜜环菌中分离得到新抗菌素melleolide；爱尔兰和法国人D.Domelly等在《J.Chem.Soc.Chem.Commun.》1982年，135页发表从人工发酵生产的蜜环菌中分离得到新抗菌素Orsellinateof Armillol；后又在《J.Nat.Prod.》1985年，48卷，10页发表了分离得到了新抗菌素4-O-methyl melleolide和Jndeol。他们均是以人工发酵生产的蜜环菌菌丝体为原料，以甲醇提取，除去甲醇后的提取物溶于水中，然后用氯仿或乙醚萃取。其氯仿或乙醚萃取物再于Sephadex LH-20柱和低压柱层析法或制备性高压液相层析法，得到上述的新抗菌素，但尚未得到过蜜环菌酸(Armillaric acid)。

本发明的目的在于提出一种以人工发酵生产的蜜环菌菌丝体为原料，提取分离新抗菌素蜜环菌酸的提取分离方法。

本发明的特征在于用相似的生产方法，即以人工发酵生产的蜜环菌菌丝体为原料，用50％甲醇水溶液回流提取，提取液在真空下除去甲醇，残留的水溶液用醋酸乙酯萃取，醋酸乙酯层用无水硫酸钠干燥后，真空下除去溶剂，得到的残留物在硅胶柱中进行层析，以氯仿—甲醇(95∶5)混合溶剂洗脱的部分，再于苯—丙酮平衡的硅胶柱中层析，有抗菌活性的部分进一步用Sephadex LH-20柱层析，甲醇洗脱部分，在制备性高压液相层析议中层析，得到一无色粉末状物，命名为蜜环菌酸(armillaric acid)该物质可溶于甲醇和丙酮中，氯仿难溶。

分子量：CIMSm/z 417(M+H)⁺

        FDMSm/z 417(M+H)⁺

分子式：C₂₃H₂₈O₇

紫外吸收光谱：

λ_maxCH3_OHnm(ε)222(25200)，266(15198)

                302(5930)

红外吸收光谱：

γ_max^KBrcm^-1 3400(br)，2500-2800(br)

              1720，1630，1580，1440，1250，

              1160，845，800

核磁共振氢谱：(以重氢甲醇为溶剂，TMS为内标，在400

              MHz型仪中测定)

δ：7.40(1H，d.，J＝1.8Hz.，8-H)

    6.12(1H，d.，J＝2.5Hz.，3′-H)

    6.15(1H，d.，J＝2.5Hz.，5′-H)

    5.70(1H，t.，J＝8.6Hz.，5-H)

    2.91(1H，dddd.，J＝9.0，7.0，2.2，1.8Hz.，

                    9-H)

    2.37(3H，s.，6′-CH₃)

    1.29(3H，s.，12-CH₃)

    1.02(3H，s.，14-CH₃)

    0.99(3H，s.，15-CH₃)

1.46(1H，dd.，J＝7.4，12.9Hz.，1-H_α)

1.36(1H，t.，J＝12.9Hz.，1-H_β)

1.96(1H，dd.，J＝9.0，13.2Hz.，10-H_α)

1.55(1H，dd.，J＝2.2，13.2Hz.，10-H_β)  

1.98(1H，dd.，J＝8.6，10.9Hz.，4-H_α)    

1.68(1H，dd.，J＝8.6，10.9Hz.，4-H_β)

2.23(1H，ddd.，J＝7.0，7.4，12.9Hz.，2-H)