[其他]从稀水溶液中回收促生长素的方法

说明书

本发明涉及从稀水溶液中回收具有生物活性的蛋白质的方法。更具体地说，本发明涉及的是，通过向稀水溶液中加入过渡金属盐类而从该溶液中回收具有生物活性的促生长素的方法。

促生长素也称为生长激素，是由许多动物的脑下垂体分泌的多肽类激素。这类激素有许多医疗应用的价值，而且可用含促生长素的配方治疗人的垂体缺陷和胃肠出血，或促进骨折的愈合，并加速挫伤及其它创伤的愈合。当通过各种给药器具或注射，给动物施予促生长素时，促生长素还可用来促进动物肉、奶的生产。（见E.J.Turman，“Some    Effects    of    Pituitary    Anterior    Growth    Factor”Thesis：Purdue    University，April，1953;L.J.Machlin    J.Anim.Sci.35：794-800（1972）;T.R.Kasser    et    al.，J.Anim.Sci.53：420-426（1981）;L.J.Machlin，J.Dairy    Sci.56：575-580（1973））.

虽然促生长素具有某种程度的种属特异性，但动物促生长素的氨基酸顺序之间却有相当大的同源性，这些激素已表明具有种属间的活性。此外，业已发现促生长素的各种活性片段。

传统的方法是从切除的垂体组织分离得到促生长素。随着DNA重组技术的出现，已有可能从经遗传工程改造的微生物获得促生长素，这些微生物含有用于生产促生长素的重组DNA。例如可参见授与Biogen    N.V.的欧洲专利申请83304574.3（公布号0    103    395）。不论促生长素的来源是动物还是微生物，都需要纯化过程以除去杂质，如其它蛋白质、多肽以及细胞碎片，而且需要保持蛋白质的合适地折叠着的具有生物活性的形式。促生长素的纯化可以用一种或多种已知的蛋白纯化方法，包括凝胶层析、亲和层析、离子交换层析、超滤、透析、用盐如硫酸铵进行沉淀、用盐酸胍或十二烷基硫酸钠从含有促生长素的物体内提取，以及许多其它已知技术。促生长素纯化技术的某些实例可见于Kirk-Othmer    Encyclopedia    of    Chemical    Technology，3rd    Edition，Volume    11;美国专利No.4，371，462，issued    to    Hecht;and    Hart，et    al.，Biochem    J.218∶573-581（1984）。

这些纯化方法中有许多方法都产生一种含促生长素的稀水溶液。因此，需要一种回收方法以从这些稀水溶液中收回纯化的促生长素。

现有的回收促生长素的方法涉及将该激素的稀溶液进行冰冻干燥，但由于产率低、设备成本高，并且在水性物质从冰冻状态升华的过程中需要保持很低的压力，所以冰冻干燥对回收干燥的具有生物活性的物质来说是一种昂贵的方法。大规模冰冻干燥则成本更高，因为所涉及的溶液体积巨大。

本领域中需要一种成本较低但并不影响促生长素生物活性的方法。

本发明的一个目的是提供一种从水溶液中回收促生长素而不降低其生物活性的廉价方法。

本发明的另一个目的是提供这样的一种方法，它与常规回收方法相比，可以降低设备成本。

本发明进一步的目的是，提供一种与常规回收方法相比可降低劳动成本的，从水溶液中回收促生长素的方法。

根据本发明，公开了一种从稀水溶液中回收促生长素的方法，包括将过渡金属盐加入水溶液中，从而与促生长素形成不溶性的络合物。

通过离心或过滤，接着利用冷冻干燥法在低温下真空去水或利用其它方法进行干燥，可从溶液中分离出不溶性的络合物。该方法能够回收干燥的具有生物活性的促生长素。