[其他]酶消痤乳霜无效
申请号: | 88100837 | 申请日: | 1988-02-11 |
公开(公告)号: | CN88100837A | 公开(公告)日: | 1988-09-14 |
发明(设计)人: | 刘耀北;蔡小元;刘芳;于泽;郑晓春;金英华;张万顺 | 申请(专利权)人: | 长春市生物工程应用技术研究所 |
主分类号: | A61K7/48 | 分类号: | A61K7/48 |
代理公司: | 长春市专利事务所 | 代理人: | 刘利民 |
地址: | 吉林省长春市*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酶消痤乳霜 | ||
本发明属于化妆品。
目前防治面部痤疮的化妆品很多,大多是在冷霜基质中加入有防治治面部痤疮作用的中草药、激素或化学药品来达到防治目的。这些化妆品有效率较低,停用后还复发,效果不好。
本发明的目的是提供一种有效率高的防治面部痤疮的化妆品。
本发明的核心内容是在冷霜基质中加入经过提纯的蛇毒精品。该精品是蛇毒原毒经过离心、过滤和柱层析分离后去掉杂质和神经毒素后的多种复合酶。蛇毒精品的提纯方法如下:将蛇毒原毒(真空干燥后的粉末)溶于Tris-HCL缓冲液中,离心10分钟,然后取上清液经G3漏斗过滤收滤液。用二乙基氨基乙基葡聚糖A-50做为吸附剂,经碱-酸-碱处理后用Tris-HCL缓冲液浸泡并平衡,然后装柱(25×80厘米),将前述过滤后收的滤液上柱,用Tris-HCL缓冲液洗脱,待第一峰下来后,柱内加入0.4摩尔/毫升NacL缓冲液直线梯度洗脱,洗脱液用部分收集器收集,每15分钟收集1管,每管4.5毫升。用分光光度计测定每管中蛋白质280NM处的光密度。然后以光密度为纵坐标,管的序数为横坐标,绘制分离光谱。共得到18个蛋白组分,结果表明,蛋白水解酶主要分布在3、6、15、17组分,其次分布在12、13组分。精氨酸酯酶主要分布在4、5、6组分,其次分布在7、8、10、11、12、15组分,将上述各组分冷冻干燥,就制成了蛇毒精品,蛇毒精品不含杂质和神经毒素,是多种酶的复合物本发明对所使用的蛇毒精品的生物活性有确切的要求,以酶中的精氨酸酯酶的生物活性为指标,要求其酶的生物活性必须在0.9酶活力单位/毫克以上。本发明对提纯前的蛇毒原毒和提纯后的蛇毒精品都进行了酶生物活性的测定,测定的原理是使被测定的样品与底物混合,测定单位时间内底物中酯的减少,从而确定酶的生物活性。具体方法如下:取干燥试管6支,分别加入0.005M的TAME(α-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐)标准溶液0.00毫升、0.20毫升,0.40毫升、0.60毫升、0.80毫升和1.00毫升,再依次加入Tris-HCL溶液2.00毫升、1.80毫升、1.60毫升、1.40毫升、1.20毫升和1.00毫升。另取试管3支分别加入0.005M的TAME0.00毫升、10毫升、10毫升,再依次加入Tris-HCL溶液1.80毫升、0.80毫升、0.80毫升,然后在这3支试管中加入被测样品(蛇毒原毒或提纯后的蛇毒精品)0.2毫升将上述9支试管放在37℃的水浴中保持15分钟后,再各加入碱性羟胺2.00毫升,在37℃水浴中保持20分钟后,各加入4N盐酸溶液1.00毫升及10%的三氯化铁水溶液1.00毫升,猛力摇振,然后在500NM处于15分钟内测定9支试管的光密度A,以TAME溶液的浓度为横坐标,A为纵坐标绘制A-C曲线,用数理统计求得回归方程中的r、a、b。根据回归方程Y=a+bX,式中Y为A,X为C,所以A=a+bC,C= (A-a)/(b) 。C是剩余底物的微克分子数。酶活力单位/毫克= (5-C)/(15×0.2) ,从而可以确定被测样品的生物活性。(前面提及的Tris-HCL缓冲液的浓度都是0.01摩尔/毫升)
为了使酶的生物活性在操做过程中不损失,前述各过程都要在10℃以下进行。在1千克本乳霜中,满足上述生物活性要求的蛇毒精品的用量为0.26~0.32克。为了保持乳霜中酶的生物活性,在1千克乳霜中还含有1~10克酶稳定剂和0.2~0.4克酶激活剂。本乳霜中还可以加入中草药白芷的浸提液和珍珠粉,1千克乳霜中可含白芷浸提液25~35克,珍珠粉1克。
面部痤疮主要是由于内分泌旺盛。微循环受阻而造成的。蛇毒精品中的蛋白水解酶和精氨酸酯酶具有改善微循环、降血脂的作用,可调节细胞的通透性,改善内分泌。因此,涂擦本乳霜后的患部,治愈后原部位不再复发。另外,白芷具有消除红肿、去炎症、解毒等作用珍珠粉具有护肤美容的功能。本发明对治面部痤疮有很好的效果,做过的100多例临床试验结果表明:治愈率为20%,显效率为40%,有效率为35%,总有效率达95%,是目前防好的防治面部痤疮的化妆品。
本发明的实施例如下:
配制1千克本乳霜用:
蛇毒精品0.3克(其精氨酸酯酶的生物活性为1.38酶活力单位/毫克)
酶稳定剂为三乙醇胺 5克;
酶激活剂为氯化钙 0.3克;
白芷浸提液 30克;
珍珠粉1克,加入冷霜基质至1千克。
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