[发明专利]多色的韦斯特恩印迹法

权利要求书

1、一种蛋白质吸附基质的显色方法，上面转移有多种蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白、脂蛋白或其混合物，其特征在于该方法包括如下步骤：

a)将基质与第一结合探针和第二结合探针的混合物一起保温，第一结合探针是未标记的，并与一种或多种蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白或脂蛋白相结合；第二结合探针是未标记的，并与一种或多种不同的蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白或脂蛋白相结合；

b)洗涤基质；

c)将基质与第一和第二标记探针的混合物一起保温，第一标记探针可与第一结合探针专一结合；第二标记探针可与第二结合探针专一结合，用第一种酶标记第一标记探针；用第二种酶标记第二标记探针；

d)洗涤基质；

e)通过将基质与第一底物一起保温以标记第一标记探针在基质中的一个或多个位置，在有第一种酶的情况下，该底物生成具有第一颜色的第一标记物质；

f)洗涤基质；

g)通过将基质与第二底物一起保温以标记第二标记探针在基质中的一个或多个位置，在有第二种酶的情况下，该底物生成具有第二颜色的第二标记物质，第一颜色和第二颜色是不同的。

2、权利要求1的方法，其特征为省去洗涤步骤（b）。

3、权利要求2的方法，其特征为步骤（a）和（c）同时进行。

4、权利要求1的方法，其特征为省去洗涤步骤（f）。

5、权利要求4姆椒ǎ涮卣魑街瑁╡）和（g）同时进行。

6、权利要求1的方法，其特征为省去洗涤步骤（b）和（f）。

7、权利要求6的方法，其特征为步骤（a）和（c）同时进行。

8、权利要求6的方法，其特征为步骤（e）和（g）同时进行。

9、权利要求6的方法，其特征为步骤（a）和（c）同时进行，步骤（e）和（g）同时进行。

10、权利要求1的方法，其特征为省去洗涤步骤（b）、（d）和（f）。

11、权利要求10的方法，其特征为步骤（a）和（c）同时进行。

12、权利要求10的方法，其特征为步骤（e）和（g）同时进行。

13、权利要求10的方法，其特征为步骤（a）和（c）同时进行，步骤（e）和（g）同时进行。

14、权利要求10的方法，其特征为步骤（a）、（c）、（e）和（g）同时进行。

15、权利要求1的方法，该方法包括步骤（g）后的附加步骤，即从基质中洗脱结合探针和标记探针，并将基质与至少一种另外的结合探针、标记探针和底物一起保温。

16、一种蛋白质吸附基质的显色方法，该基质上转移有多种蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白、脂蛋白或其混合物，其特征在于该方法包括如下步骤：

a）将基质与第一探针和第二探针的混合物一起保温，第一探针用第一种酶标记并与一种或多种蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白或脂蛋白相结合;第二探针用第二种酶标记，并与一种或多种不同的蛋白质、蛋白质片段、糖蛋白或脂蛋白相结合;

b）洗涤基质;

c）通过将基质与第一底物一起保温以标记第一探针在基质中的一个或多个位置，在有第一种酶的情况下，该底物生成具有第一颜色的第一标记物质;

d）洗涤基质;

e）通过将基质与第一底物一起保温以标记第二探针在基质中的一个或多个位置，在有第二种酶的情况下，该底物生成具有第二颜色的第二标记物质，第一种颜色和第二种颜色是不同的。

17、权利要求16的方法，其特征为省去洗涤步骤（d）。

18、权利要求17的方法，其特征为步骤（c）和（e）同时进行。

19、权利要求16的方法，其特征为省去洗涤步骤（b）和（d）。

20、权利要求19的方法，其特征为步骤（c）和（e）同时进行。

21、权利要求19的方法，其特征为步骤（a）、（c）和（e）同时进行。

22、权利要求16的方法，该方法包括步骤（e）后面的附加步骤，即从基质中洗脱第一和第二探针，并将基质与至少一种外加的探针和底物一起保温。