[发明专利]地龙溶栓酶的制备及其鉴定方法无效
申请号: | 88101579.2 | 申请日: | 1988-04-04 |
公开(公告)号: | CN1037345A | 公开(公告)日: | 1989-11-22 |
发明(设计)人: | 牛勃;程牛亮;单鸿仁;张祖询 | 申请(专利权)人: | 牛勃 |
主分类号: | C07K15/08 | 分类号: | C07K15/08;C07K3/02;G01N33/573 |
代理公司: | 农牧渔业部专利事务所 | 代理人: | 杨厚 |
地址: | 北京市东*** | 国省代码: | 北京;11 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 地龙 溶栓酶 制备 及其 鉴定 方法 | ||
1、一种地龙溶栓酶的制备及其作用、作用机制和性质的鉴定方法,其特征在于所说的地龙溶栓酶是从蚯蚓内体分离提取的一种成份。
2、根据权利要求1所述的制备方法,其特征是以新鲜蚯蚓为原料,经细胞碎裂、硫酸铵分段盐析、超滤膜超滤分级分离及DEAE纤维素、DEAE-Sephadex-A-25和Sephadex-G-50三种柱层析方法,可从蚯蚓体内得到聚丙烯酰胺电泳纯地龙溶栓酶。
3、根据权利要求1所述的制备方法,其特征是地龙溶栓酶的活性,是采用酪蛋白或纤维蛋白为底物,酚试剂为显色剂,721型分光光度计为测定仪器,把不同酶量与相同浓度底物作用后的样品进行光谱分析确定的。
4、根据权利要求1所述的制备方法,其特征是该酶的分子量可用SDS-聚丙烯酰胺电泳结合Sephadex-G-50柱层析进行测定,结果证明,其分子量为29,000道尔顿,该酶的热稳定性可比较各种温度下的酶的活力进行鉴定,结果证明,在25-50℃保温三小时酶的活力基本不变,其最适温度为57℃,该酶PH的影响可比较不同PH值条件下的酶活力进行鉴定,结果表明,在PH4.7-11.0范围内,酶作用稳定,而其最适PH值为8.0。
5、根据权利要求1所述的制备方法,其特征是该酶的作用与作用机制的鉴定方法是,体外以动或人血浆形成1mm3的凝块,用生理盐水洗涤数次(10次左右)然后加入溶于PH7.4缓冲液中的各种浓度的酶溶液,观察其溶解情况,其定量分析方法是,用50mg/ml药用纤维蛋白原溶液加10μ/ml凝血酶制成1mm2原纤维蛋白平板,然后将该酶溶液点于平板上,在12小时内观察溶解面积,再用与该酶作用一定时间后的纯纤维蛋白原样品,进行聚丙烯酰胺电泳和SDS聚丙烯胺电泳,观察其特异性。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于牛勃,未经牛勃许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/88101579.2/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:电熔镁砂的生产工艺方法
- 下一篇:作水泥缓凝剂的磷石膏的改性方法