[其他]环状抗凝血肽的制备方法

说明书

本发明及用作抗凝血剂的新颖的环状肽。

抗凝血剂在如急性深度静脉血栓症，肺栓塞、四肢的急性动脉栓塞、心肌梗塞及播散型血管内凝血的药理学治疗中是有用的治疗剂。预防性使用抗凝血剂被确信能防止风湿性或动脉硬化心脏病患者栓塞的复发及防止外科手术中某些血栓栓塞并发症。也曾指出，在治疗冠状动脉及脑血管病时，使用抗凝血剂。动脉血栓的形成、特别是在供应心肌及肪的动脉中的动脉血栓的形成是致死的主要原因。

水蛭素是从蚂蟥的唾腺中分离出来的一种65个残基的多肽。它是一种抗凝血剂，即它是凝血酶的一种特殊的抑制剂。尽管它十分有效，但临床使用由蚂蟥提取物中分离出来的水蛭素似乎是不可能的，这是因为其数量有限，价格昂贵及会引起过敏反应，这种过敏反应会随着服用任何同样大小的外来蛋白质而产生。

申请人发现了水蛭素和特定部位至少部分地具有抗凝血活性。用化学方法合成了这个部位，并且其某些环状类似物看来能和凝血酶的识别部位结合，而不和在空间上隔开的酶促裂解部位结合。合成肽的结合作用竞争性地防止了纤维蛋白原和凝血酶的识别部位的结合，纤维蛋白原和凝血酶的结合是产生纤维蛋白及凝块形成的前提条件。本发明的肽具有显著的抗凝血活性，它们仅和凝血酶的识别部位结合而不和其裂解部位结合的特殊性能在学术上是极有兴趣的，并且在治疗学上对于抗凝血剂疗法是一个重要的手段。

本发明涉及式1结构的水蛭素衍生物，

其中X是从氢、1-6个碳原子的一个或两个烷基、2-10个碳原子的一个或两个酰基、苄氧羰基或叔丁氧羰基中选择出的氨基端基残基。

A₁是一个键或是含1-5个任何氨基端基残基。

A₂是phe、subphe，β-（2-和3-）噻吩基丙氨酸、β（2-和3-）呋喃基丙氨酸、β-（2-，3-，和4-）吡啶基丙氨酸、β-（2-和3-苯并噻吩基）丙氨酸，β-（1-和2-萘基）丙氨酸、Tyr或Trp;

A₃是Glu或Asp;

A₄是任何氨基酸;

A₅是Ile，Val，Leu，Nle或Thr;

A₇是任何氨基酸;

A₈是任何氨基酸;

A₁₀是从Tyr，Tyr（SO₃H），Trp，Phe，Leu，Nle，Ile，Val，His和Pro中选择出的一种亲脂性氨基酸或者是至少含一个上述亲脂性氨基酸的二肽。

A₁₁是一个键或者是含1-5个任何氨基酸残基的肽片断。

Y是从OH，（C₁-C₆）烷氧基，氨基，单或双（C₁-C₄）烷基取代的氨基或苄氨基中选择出的羧基端基残基;

R，R′，R₁，R₁′分别从氢或（C-C）烷基中选择;

B从-S-，-S-S-，或-S-AlK₃-S-中选择，

AlK₁，AlK₂和AlK₃分别从（C₁-C₈）亚甲基或1，2-亚乙基中选择;其中的“D”及“L”表示所指的碳原子的立体化学分别相应于D-半胱氨酸和L-半胱氨酸的构型。同时还指出这些肽衍生物及其混合物的二聚体以及这些肽的衍生物、二聚体及其混合物作为抗凝血剂使用。

本说明书全文使用如下的氨基酸的通用略语：

GLy-甘氨酸

ALa-丙氨酸

VaL-缬氨酸

Leu-亮氨酸

ILe-异亮氨酸

Pro-脯氨酸

Phe-苯丙氨酸

Trp-色氨酸

Met-蛋氨酸

Ser-丝氨酸

Thr-苏氨酸

Cys-半胱氨酸

Tyr-酪氨酸

Asn-天冬酰胺

Gln-谷氨酰胺

Asp-天冬氨酸

Glu-谷氨酸

Lys-赖氨酸

Arg-精氨酸

His-组氨酸

Nle-正亮氨酸

Hyp-羟基脯氨酸

3，4-脱氢脯氨酰-3，4-脱氢脯氨酸

Tyr（SO₃H）酪氨酸硫酸酯

Pgl-苯基甘氨酸

NMepgl-N-甲基-苯基甘氨酸