[发明专利]用双链核糖核酸调节淋巴激活素抗性细胞状态

说明书

本发明涉及单独使用或与淋巴激活素结合使用双链核糖核酸（以下简称dsRNA）以抑制动物包括人体内的瘤细胞增殖、纠正动物包括人体内肿瘤或癌性细胞中的缺陷、并治疗因某些个体具有易感受肿瘤或癌性条件的素质所致的免疫系统紊乱，而不管这种素质产生于遗传还是环境因素。本发明还涉及dsRNA与其他化学和生物学制剂结合以治疗肿瘤或癌性状态的应用。

Ⅰ.IFN功能及作为IFN诱导剂的dsRNA

干扰素（下称IFN）构成一类能抑制动物细胞内病毒复制的蛋白质。它们是细胞来源的，可在体外或体内产生，并可被相当广泛的材料刺激（The    Encyclopedia    of    Biochemistry，Roger    Williams和Edwin    Lansford编，Reinhold    Publishing    Company，1967）。已知IFN具有抗增殖作用及抗病毒作用（Natare    262，300，1978）、重建接触抑制作用（J.Cell    Bio;56，846，1973），并抑制瘤细胞在半固态琼脂中生长（Nature，231，20，1971）。

dsRNA是包括z（白细胞）、β（成纤维细胞）和7（免疫）型等不同人IFN分子的诱导剂（J.Reticuloendothelial    Society，23，299，1978），天然和合成的dsRNA均可刺激IFN产生。例如Lampson等人在美国专利3666646号中所述以多聚核糖肌苷酸和多聚核糖胞苷酸（以下简称r    In·r    Cn或Poly    IC）之复合物形式存在的合成的dsRNA，严格地说即是一种已知的干扰素诱导剂。除了其诱导IFN的作用外，dsRNA还是各种IFN诱导的酶即一种蛋白激酶和一种2′-5′寡聚腺苷酸合成酶的激活剂（Proc.Natl.Acad.Sci.，75，5893，1978）。然而，尚不知道干扰素抗增殖和抗恶变作用的分子基础及它们与dsRNA的关系，而且在本发明之前也不知道dsRNA除作为干扰素诱导剂之外的任何抗增殖作用。

Ⅱ.合成的dsRNA的失配类似物

最近发现IFN也能被r    In·r    Cn的失配类似物诱导（见Ts′o和Carter的美国专利4130641及4024222号）。这些类似物是经修饰r    In·r    Cn以沿着多聚核糖胞苷酸（r    Cn）链掺入未配对的碱基（尿嘧啶或鸟嘌呤）或经修饰多聚核糖肌苷酸（r    In）之核糖基骨架而形成的。失配的类似物，特别是以r    Cn链修饰的类似物只要符合某些结构要求，即可保留诱导干扰素的能力。如图解所示，优选碱基完全配对的dsRNA的长区域并不适于诱导干扰素的要求。实际上，适于激发干扰素合成的结构上的先决条件似乎在于保留1/2到1圈碱基完全配对之dsRNA螺旋。

已注意到当失配多聚物与核酸酶接触时可加快水解速度（J.Molec.Biol.，70，567，1972），另外就干扰素诱导作用来说这些dsRNA的活性接近于未修饰的r In·r Cn。有人提出延长保留完整的双螺旋结构与常常视为药物毒性的对dsRNA的许多其他生物学反应有关。在各种动物系统中研究HEM Research有限公司（Rockville，Md.，10852，USA）的美国注册商标为Ampligen的失配类似物r In·r（C_11-14，U）n，表明r In·r（C₁₂，U）n的毒性小于r In·r Cn（见Poly IC with mismatched bases，prospects for cancer therapy，Augmenting Agents in Cancer Therapy，E.M.Hersh等人编，Raven Press，New York，177，1981）。特别是，对小鼠重复给予r In·r（C_-，U）n，对小鼠骨髓成分、肝细胞、胸腺细胞和脾细胞等极敏感的器管将产生小得多的毒性（J.Molec.Biol.70，567，1972），但同时又保留了阻止各种致死性病毒攻击的效能（Molec.Pharm.，12，299，1976）。