[发明专利]用于测定酶动力学的方法

权利要求书

1、一种定量测定样品中被分析酶的方法，其中通过酶催化底物/辅因子组的反应可以测定该酶的存在，该方法包括下列步骤：

(a)将存在于定量待分析样品中的被分析酶固定在层析介质上的某一反应位点，

(b)使所说层析介质与包括底物/辅因子组的溶液相接触，该反应辽傩纬梢桓龇从Σ锊⒂伤当环治雒复呋浞从λ俾视胨嬖诿傅牧肯喙兀?

(c)将所说溶液输送到所说反应位点并使所说底物/辅因子组在所说酶存在下反应，形成所说反应产物，

(d)将所说溶液和所说反应产物从所说反应位点输送至所说反应位点下游的检测区，和

(e)通过测定(i)底物/辅因子组的消耗速率或(ii)所说反应产物的产生速率来确定该酶催化反应的速率。

2、权利要求1所述方法，其中通过使反应产物经历一步或多步附加反应并且通过测定（ⅰ）在一步或多步所说附加反应中反应物的消耗速率或（ⅱ）在一步或多步所说附加反应中产物的产生速率来确定所说反应产物的产生速率。

3、权利要求1或2所述方法，其中通过测定检测区中某一选择位点上所说成份的浓度，由此来确定选自下列成份之一的消耗或产生速率，这些成份包括：（1）底物/辅因子组;（2）所说第一反应产物;（3）至少一步所说附加反应或多步附加反应中的某一反应物或（4）至少一步所说附加反应或多步附加反应中的某一产物。

4、权利要求3所述方法，其中检测区中的选择位点含有选择自下列成份之一，这些成份包括：（1）底物/辅因子组;（2）所说第一反应产物;（3）至少一步所说附加反应或多步附加反应中的某一反应物和（4）至少一步所说附加反应或多步附加反应中的某一产物，在被分析酶的稳定态反应期间产生上述产物。

5、权利要求2所述方法，其中通过催化剂固定在第二反应位点来催化所说一步附加反应或多步附加反应。

6、权利要求5所述方法，其中所说催化剂是一种酶。

7、权利要求3所述方法，其中通过目视或分光光度计测定选自下列成份之一的浓度，这些成份包括：（1）底物/辅因子组;（2）所说第一反应产物;（3）至少一步所说附加反应或多步附加反应的某一反应物和（4）至少一步所说附加反应或多步附加反应的某一产物。

8、权利要求7所述方法，其中用目视法测定所说浓度。

9、一种用于定量测定样品中被分析酶的工具，其中通过催化底物/辅因子组成份的反应可以测定所说酶，该工具包括：

（a）一种层析介质，该介质包括一个反应位点，可以将存在于所说样品中的被分析酶固定在该位点上;和

（b）一种定量的溶液，该溶液包括由所说酶催化的底物/辅因子组反应成份。

10、权利要求9所述工具，其中所说层析介质包括一个第二反应位点，催化剂固定在该位点并能催化消耗所说被分析酶催化反应产物的第二反应。