[发明专利]L-门冬氨酰-丙氨酸、丝氨酸和甘氨酸二肽酯和酰胺甜味剂单质或混合物及制备方法

说明书

本发明属于化学合成二肽甜味剂。

1969年Mazur[（R.H.Mazur，J.Amer.Chem.Soc.，91，2684（1969）]发现了一类新型味剂，一般式为：

其为R为苄基，是一个目前许多国家的卫生部门准许食用的甜味剂，商品名称阿斯帕坦（Aspartame，缩写为APM），其甜度为蔗糖的200倍，虽APM已被广泛使用，但它尚存在不足之处：1.其结构中的苯丙氨酸，对先天性遗传的苯丙酮尿毒症患者有剧毒，婴儿更不宜食用。2.结构中的甲酯对酸、碱、热均不稳定，通常宜在pH3-5的低温食品中使用，如在含水食物中，久搁将变为二酮哌嗪或水解成酸，其分解产物具有苦味，故含此甜味剂的食品在储运，上市期限都受温度，湿度的环境影响和本身分解半衰期限制，使用时有诸多不便。

1973年Fujino[M.Fujino        et        al.，（a）Naturwiss.，60，351，（1973）;（b）Chem.Pharm.Bull.，24，2112（1976）]报导了一个具有22000-33000倍甜度的二肽甜味剂，即L-门冬氨酰-氨基丙二酸甲葑双酯，其结构式为：

葑醇有四种立体异构体，即d-α-，d-β-，1-α-，1-β-葑醇，其中dβ-葑醇的二肽甜度最高，但其结构，包含有非天然的合成成分，因为它包含甲酯基和葑酯基，其不稳定程度较AMP有过之而无不及。

本发明目的在于寻找出一种毒性低，甜度高，稳定性好，价格廉的二肽甜味剂，为此我们设计出完全采用自然界存在的氨基酸，以门冬氨酸，丙氨酸、丝氨酸和甘氨酸来合成二肽甜味剂。

本发明特征为该类L-门冬氨酰-氨基酸二肽酯或酰胺，一般式为：

式中R₂分别为CH₃，CH₂OH，H;R₁可为OR或NHR：

合成该类化合物通常采用的以下的方法：

A.氨基酸经苄酯基氯或苯甲氧甲酰氯，对位有取代的苄酯基氯，酸类，甲酸甲酰化保护氨端氨基酸;醇类或三甲基氯硅烷保护羧端氨基酸。

B.二种保护的氨基酸经二环己基碳二亚胺（DCCI）、混合酸酐，缩合得二肽化合物。

C.含保护基的肽化合物经钯黑氢解、氢溴酸水解脱去保护基。

采用上述方法A氨基酸的氨端与苄酯基氯或苯甲氧甲酰氯，对位有取代的苄酯基氯、酸类，在无水乙醚、水、甲酸、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯等等溶剂进行反应。氨基酸为L-门冬氨酸、D-或D，L-丙氨酸、D-或DL-丝氨酸、甘氨酸。L-门冬氨酸配以甘氨酸、丙氨酸或丝氨酸合成一系列二肽甜味剂。L-门冬氨酸在碱性介质中，冷却下加入苄酯基氯和氢氧化钠，反应完成后，用乙醚洗，除去多余的苄酯基氯，水溶液酸化，冷却析出结晶，得N-苄酯基-L-门冬氨酸，它与苄醇在含有对-甲苯磺酸的甲苯溶液中，加热反应脱水，冷却后加氧化镁振摇，过滤，减压除去溶剂和过量的苄酯，得油状物，重结晶得氨基由苄酯基保护的L-门冬氨酸双酯。所得氨基由苄酯基保护的L-门冬氨酸双酯溶于含水丙酮，室温、搅拌下加入氢氧化锂的水溶液，低温下蒸去酮，用乙醚萃取，除去未反应的双酯，水层用6N盐酸酸化，得油状物的β-苄酯，苯中重结晶。（实施例1）。

苄醇在搅拌下，加入到硫酸乙醚中，除去乙醚，加入L-门冬氨酸，使其全部溶解，放置一天，搅拌下加入95%乙醇，冷却下，边搅拌边滴加吡啶，放置析出结晶，过滤，干燥，所得L-门冬氨酸-β-单苄酯。（实施例2）

L-门冬氨酸β-单苄酯溶于热水中，使溶解后，待冷到60℃，加入NaHCO₃和苄酯基氯，继续搅拌反应3小时，用乙醚摇洗三次，然后用浓盐酸酸化至pH2，冰箱放置，结晶折出，过滤、干燥、重结晶得氨端由苄氧羰基保护的L-门冬氨酸β-苄酯。（实例3）L-门冬氨酸的氨基保护和羧基保护的先后，可视反应的具体情况而定。

L-门冬氨酸制成酸酐盐酸盐。L-门冬氨酸于四氢呋喃中，搅拌成浮悬液，加入三氯氧磷（POCl₃）或三氯化磷（PCl₃），搅拌反应，冷却至5-10℃继续反应，反应完全后，过滤，结晶用四氢呋喃洗，得L-门冬氨酸的酸酐盐酸盐。（实例4）。