[发明专利]新的蛋白水解酶及其在洗涤剂中的应用

权利要求书

    1.一种制备用于洗涤剂中的突变型蛋白酶的方法，该突变型

蛋白酶与具有下列氨基酸序列的PB92丝氨酸蛋白酶的氨基酸序

列有至少70％同源性：H₂N-A-Q-S-V-P-W-G-I-S-R-V-Q-A-P-A-A-H-N-R-G-L-T-G-S-G-V-K-V-A-V-L-D-T-G-I-S-T-H-P-D-L-N-I-R-G-G-A-S-F-V-P-G-E-P-S-T-Q-D-G-N-G-H-G-T-H-V-A-G-T-I-A-A-L-N-N-S-I-G-V-L-G-V-A-P-N-A-E-L-Y-A-V-K-V-L-G-A-S-G-S-G-S-V-S-S-I-A-Q-G-L-E-W-A-G-N-N-G-M-H-V-A-N-L-S-L-G-S-P-S-P-S-A-T-L-E-Q-A-V-N-S-A-T-S-R-G-V-L-V-V-A-A-S-G-N-S-G-A-G-S-I-S-Y-P-A-R-Y-A-N-A-M-A-V-G-A-T-D-Q-N-N-N-R-A-S-F-S-Q-Y-G-A-G-L-D-I-V-A-P-G-V-N-V-Q-S-T-Y-P-G-S-T-Y-A-S-L-N-G-T-S-M-A-T-P-H-V-A-G-A-A-A-L-V-K-Q-K-N-P-S-W-S-N-V-Q-I-R-N-H-L-K-N-T-A-T-S-L-G-S-T-N-L-Y-G-S-G-L-V-N-A-E-A-A-T-R-COOH；

在相应于所述PB92丝氨酸蛋白酶中102，116，126，127，128，

130，160，166，169，211，212和216的所选位点上至少有一个氨基

酸残基是不同的；该突变型蛋白酶相对于所述的PB92丝氨酸蛋

白酶而言具有改善的洗涤性能和/或改善的稳定性；所述的方法包

括：

    生产一种编码所述突变型蛋白酶的基因，将所述的基因克隆

到一载体中，用得到的DNA转化一细菌菌株，将所述的基因再克

隆到一表达载体中，用得到的结构转化芽孢杆菌宿主菌株，培养转

化体，并回收和纯化所述的突变型蛋白酶。

    2.根据权利要求1的方法，其中编码所述突变型蛋白酶的基

因是通过诱变编码与PB92的氨基酸序列有至少70％同源性的蛋

白酶的已克隆的基因或其片段而得到的。

    3.根据权利要求1的方法，其中所得到的突变型蛋白酶经鉴

定具有至少一种可用于洗涤剂中的改善的特性。

    4.根据权利要求1的方法，其中所述的芽孢杆菌宿主菌株是

一种嗜碱芽孢杆菌菌株。

    5.根据权利要求4的方法，其中所述的嗜碱芽孢杆菌菌株是

芽孢杆菌新种PB92。

    6.根据权利要求1的方法，其中所述的芽孢杆菌宿主菌株选

自枯草芽孢杆菌、地衣形芽孢杆菌和淀粉液化芽孢杆菌。

    7.根据权利要求1的方法，其中所述的酶是PB92丝氨酸蛋

白酶突变体                                [M216S]；[M216Q]；[N212D]；[S160D]；[S160G，N212D]；[S160D，M216Q]；[S160D，M216S]；[A166D，M169I]；[G116V，S126V，P127E，S128K]；[G116V，S126G，P127Q，S128I]；[G116V，S126L，P127N，S128V]；[G116V，S126L，P127Q，S128A]；[G116V，S126V，P127M]；[G116V，S126H，P127Y]；[G116V，S126R，P127S，S128P]；[G116V，S126F，P127Q]；[G116V，S126F，P127L，S128T]；[S126M，P127A，S12SG]；[S126M，P127A，S128G，S160D]；or[G116V，S126N，P127S，S128A，S160D].

8.含有一种或多种通过权利要求1-7之任一项所述的方法得到的突变型蛋白酶的洗涤剂组合物。