[发明专利]生产抗肿瘤抗菌素克达西啶的方法

说明书

本申请是在1988年4月12日提交的美国USSN 180519的部分继续申请。

本发明涉及本文称为克达西啶(Kedarcidin)的一种抗肿瘤抗菌素、通过用Streptoalloteichus新种的菌株L585-6生产该抗菌素、含有该抗菌素的药物组合物、以及用所说抗菌素抑制肿瘤生长的方法。本发明也涉及生产克达西啶的微生物Strep-toalloteichus新种菌株L585-6，CCTCC NO.M89022。

本发明提供的抗肿瘤抗菌素克达西啶，其特征如下：

(a)外观：浅黄色固体；

(b)分子量：用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法测定为

12400道尔顿；用凝胶过滤/高效色谱法(HPLC)

测定为17,000道尔顿；

(c)紫外光谱：基本上如图1所示；

(d)等电点：3.65

(e)包括一种具有如下氨基酸序列的多肽：X-ala-ala-val-ser-val-ser-pro-ala-thr-gly-leu-ala-asp-gly-ala-thr-val-thr-val-ser-ala-ser-gly-phe-ala-thr-ser-thr-ser-ala-thr-ala-leu-gln-cys-ala-ile-leu-ala-asp-gly-arg-gly-ala-cys-asn-val-ala-glu-phe-his-asp-phe-ser-leu-ser-gly-gly-glu-gly-thr-thr-ser-val-val-val-arg-arg-ser-phe-thr-gly-tyr-val-met-pro-asp-gly-pro-glu-val-gly-ala-val-asp-cys-asp-thr-ala-pro-gly-gly-cys-gln-ile-val-val-gly-gly-asn-thr-gly-glu-tyr-gly-asn-ala-ala-ile-ser-phe-gly-OH；

式中X选自H-ala-ser、H-ser和H。

上述物理化学特征区别了本发明的抗菌素与其他的已知具有抗肿瘤活性的肽类抗菌素，如新制癌菌素、巨毛霉素、广霉素、放线黄质素及AN-7D。

本发明还提供了一种生产抗菌素克达西啶的方法，该方法包括在一种含有可同化碳和氮源的介质中，在浸没式好氧条件下培养产生克达西啶的Streptoalloteichus的菌株，并从该发酵液中回收所说的蛋白质。

本发明的另一方面是提供一种产生克达西啶的Streptoallo-teichus新种的菌株L585-6，CTCC NO.M89022。

本发明的另一方面是提供了一种包含了抑制肿瘤量的抗菌素克达西啶和一种药用载体的药物组合物。

本发明还有一方面是提供一种在哺乳动物宿主中抑制肿瘤生长的方法，包括对所说的患肿瘤的宿主施用能抑制肿瘤量的抗菌素克达西啶。

图1给出了抗菌素克达西啶的紫外光谱。

本文所用的以下缩语及代表的氨基酸如下：

asx：天冬氨酸+天冬酰胺

thr：苏氨酸

ser：丝氨酸

glx：谷氨酸+谷氨酰胺

asp：天冬氨酸

asn：天冬酰胺

glu：谷氨酸

gln：谷氨酰胺

pro：脯氨酸

gly：甘氨酸

ala：丙氨酸

val：缬氨酸

met：蛋氨酸

ile：异亮氨酸

leu：亮氨酸

tyr：酪氨酸

phe：苯丙氨酸

his：组氨酸

lys：赖氨酸

arg：精氨酸

cys：半胱氨酸

trp：色氨酸

菌株L585-6是由印度，Maharastra州收集的土壤样中分离出来的。菌株L585-6的特征详述于下：形态学：

菌株L585-6是一种革兰氏阳性的能形成基底和气生菌丝体的丝状有机体。基底菌丝体穿过琼脂而不分节。观察到菌丝的球状密集的聚集体，其直径为5-25微米，与结合的营养菌丝一起。这种气生菌丝体充分地分枝并生长成直的旋转的或螺旋形的长菌丝，在其中形成连续或不连续链状的孢子。分支的短孢子链的密集团主要是在ISP5号培养基中生成。两种类型的孢子都是卵形到短园柱形(0.4-0.6×1.0-2.0μm)，是不游动的而且具有光滑的表面。