[发明专利]基因检测方法及其装置无效
申请号: | 89104603.8 | 申请日: | 1989-05-27 |
公开(公告)号: | CN1043432C | 公开(公告)日: | 1999-05-19 |
发明(设计)人: | 神原秀记 | 申请(专利权)人: | 株式会社日立制作所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N33/52 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 辛敏忠 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 检测 方法 及其 装置 | ||
1.一种基因检测方法,其包括下述步骤:Ⅰ)制备一荧光标记之、与被检基因互补的DNA探针,该DNA探针具有约20个碱基长度,且所述基因具有300个以上的碱基长度;Ⅱ)将样品基因与所说的DNA探针混合,以使该基因与所说的DNA探针杂交;Ⅲ)在含有2-6%(w/v)单体浓度的聚丙烯酰胺凝胶(3)上用电泳方法将与待检基因杂交的DNA探针同游离DNA探针分离开,从而由所说的凝胶(3)中除去所说的游离DNA探针;以及Ⅳ)用光学方法检测已除去了游离DNA探针的所得凝胶(3),以检测荧光标记并已杂交的DNA探针。
2.一种基因检测方法,其包括以下步骤:Ⅰ)将样品基因与互补于待测基因并用荧光标记的DNA探针混合并进行杂交,从而形成杂交DNA探针与游离DNA探针的混合物;该DNA探针具有约20个碱基长度,且所述基因具有300个以上的碱基长度;Ⅱ)将所说的混合物由其一端注入电泳凝胶(3)中;该凝胶为含有2-6%(w/v)单体浓度的聚丙烯酰胺凝胶;Ⅲ)以电泳方法将所说凝胶(3)中的所说的杂交DNA探针与所说的游离DNA探针分离开,从而使所说的游离DNA探针流入与所说凝胶(3)下游端相接触的缓冲液(4)中,而只使已杂交的DNA探针留在所说的凝胶(3)内;以及Ⅳ)在完成上述步骤Ⅲ)后,使所说的凝胶(3)暴露于激发光(11)并检测所产生的荧光(20)。
3.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说步骤Ⅱ)中的迁移时间为2-5分钟。
4.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说凝胶的长度为1cm-5cm。
5.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说的凝胶(3)被装在圆柱形样品容器(2)内。
6.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说的凝胶(3)在其上表面带有用于注射样品的槽。
7.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说的凝胶(3)是平板状的,且在其上表面上有许多双向排列的注射样品的槽。
8.根据权利要求2的基因检测方法,其中步骤Ⅲ)所说的电泳分离是在迁移泳道上进行的,且所说步骤Ⅳ)中荧光(20)的检测是随着将各泳道移向暴露于激发光(11)的区域而连续进行的。
9.根据权利要求2的基因检测方法,其中所说的步骤Ⅲ)所说的电泳分离是在带有迁移泳道的凝胶上进行的,且所说的步骤Ⅳ)中的荧光检测是用激发光(11)光线按同一方向同时照射所说的泳道,并沿着垂直于激发光的方向(61)移动凝胶,以用行式感受器检测荧光。
10.一种基因检测装置,其包括:
一个用于对荧光标记的样品进行电泳凝胶迁移,以使具有20个碱基长度的游离DNA探针流入与所说凝胶(3)之下游端接触的缓冲液(4)中的电泳分离器(25),所说的样品具有300个以上的碱基长度,且所说的凝胶为含有2-6%(w/v)单体浓度的聚丙烯酰胺凝胶;
一个当所说的游离DNA探针流入所说的缓冲液(4)之后,用于激发保留于从所说电泳分离器(25)中除去之所说凝胶(3)内的样品发射荧光的激发光源(6);以及
用于检测由所说样品产生之荧光(20)的装置。
11.根据权利要求10的基因检测装置,其中所说的凝胶(3)的长度为1cm-5cm。
12.根据权利要求10的基因检测装置,其中所说的凝胶(3)被装在一圆柱形样品容器(2)内。
13.根据权利要求10的基因检测装置,其中所说的凝胶(3)在其上表面带有用于注射样品的槽。
14.根据权利要求10的基因检测装置,其中所说的凝胶(3)是平板状的,且在其上表面上有双向排列的用于注射样品的槽。
15.根据权利要求10的基因检测装置,其进一步包括一个将由所说电泳分离器(25)中取出之至少一片所说凝胶(3)的迁移泳道连续地移向暴露于激发光的区域的装置。
16.根据权利要求10的基因检测装置,其中来自所说的激发光源(6)的光线以同一方向同时照射所说凝胶迁移泳道,且用于检测荧光的装置装有一行式感受器,且通过以垂直于所说激发光(11)的方向(61)移动所说凝胶来检测所述荧光。
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