[发明专利]抗生素GE2270的制备方法

说明书

本发明涉及一种命名为抗生素GE2270的新的抗生素物质、其加成盐、药物组合物以及它们作为药物的应用，特别是在治疗对它们敏感的微生物所引起的感染疾病的应用。

本发明的化合物在动物中如家禽、猪、反刍动物等还具有生长促进剂的活性。

本发明的另一目的是制备抗生素GE 2270的方法，其中包括培养玫瑰游动双孢菌(Planobispora rosea)ATCC 53773或它的产生抗生素GE2270的变异体或突变体。并从菌丝体和/或发酵肉汤中分离出本发明的抗生素。

玫瑰游动双孢菌ATCC 53773是从土壤样品中分离出来的，并且根据根据布达佩斯条约的规定于1988年6月14日寄存于美国典型菌种保藏中心(ATCC)该菌株也已于1989年8月12日保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其保藏编号为CGMCC No.0141。

通过培养一个可产生抗生素GE 2270的游动双孢菌菌株即玫瑰游动双孢菌ATCC 53773或它的产生抗生素GE 2270的变异体或突变体，可以得到抗生素GE 2270的产物。培养在有氧条件下，在水性营养培养基中进行。该培养基含有可同化碳源、氮源及无机盐。在发酵技术中经常使用的许多营养培养都可以使用。但是某些培养基更好些。优选的碳源为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、淀粉、谷粉等。优选的氮源为氨、硝酸盐、大豆粉、胨、肉提取物、酵母膏、胰蛋白胨、氨基酸等。可用于培养基中的无机盐为通常可产生钠、钾、铁、锌、钴、镁、钙、铵、氯化物、碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等离子的可溶性盐。

通常将可产生抗生素的菌株在振荡瓶中预培养，然后将培养物接种于发酵罐中，从而产生大量的抗生素物质。用于预培养的培养基可与大量发酵使用的相同，也可以用其他的培养基。产生抗生素GE2270的菌株可以在20～40℃生长，最好在24～35℃生长。

在发酵过程中，可通过例如生物鉴定或TLC或HPLC方法检验培养液或菌丝体提取物样品中抗生素的活性来监测该抗生素的生产。

对于抗生素GE2270敏感的生物体如枯草杆菌和金黄色葡萄球菌都可以作为试验生物体。生物鉴定可以很方便地通过在琼脂板上的琼脂扩散方法进行。一般在发酵的第2天至第5天产生最大量的抗菌活性。

抗生素GE2270是通过培养菌株玫瑰游动双孢菌ATCC53773或它的产生抗生素GE2270的突变体或变异体产生的。并且发现主要存在于菌丝体中。

在本申请中，当论述本发明化合物的物理化学或生物学性质时，术语“抗生素GE2270”一般被认为是指发酵过程终止时回收的抗生素GE2270复合物(见例2)，也可以是它的主要成分抗生素GE2270因子A。

玫瑰游动双孢菌ATCC53773的形态特征

玫瑰游动双孢菌ATCC53773可生长在大多数标准培养基中。植物菌丝体形成长的不规则分枝丝状体(0.5至1.0微米)穿透琼脂，并在其表面紧密的生长。无论生长在液体还是固体培养基中，菌丝体都不破碎。在大多数试验培养基中其颜色变化范围从浅珊瑚色至粉红珊瑚色。需氧菌丝体形成长的波状的细长菌丝，侧面很少分枝，并且与琼脂表面基本平行地生长在空气中。需氧菌丝体如果有的话呈白一粉红色。孢子囊单独地或成组地沿着需氧菌丝体的菌丝生长，其长约6.0～8.0微米，宽约1.0～1.2微米。它们通过短的孢子囊柄(1.2～2.0微米长)与菌丝相连。在每个孢子囊上形成一对纵向的棱形直的孢子(3.0至3.5×1.0至1.2微米)。在孢子囊中，孢子被横向隔膜分开。在从孢子囊被膜中释放出来以后，孢子靠其周围的鞭毛活动。

玫瑰游动双孢菌ATCC53773的培养特征

为进行培养特征的检测，在含有几种由Waksman所建议的培养基添加物(Waksman，S.A.1961—放线菌—TheWilliams and Wilkins Co.Baltimore；Vol.2，328-334)的Shirling和Gottlieb所建议的各种标准培养基中培养(Shirling E.B和Gottlieb D.，1966-测定链球菌种特征的方法-Int.J.Syst.Bacteriol，16，313-340)。

需要时可通过Maerz和Paul的方法进行颜色测定(MearzA.和M.Rea Paul，1950—颜色词典—第2版McGraw-Hill Book ComPany Inc.New York)。

该生物体利用不同碳源的能力通过Shirling和Gottlieb所描述的方法测定。