[发明专利]通过原位抑制杂交对人个体中期和间期细胞染色体定位

权利要求书

1、标记个体哺乳类染色体的方法，在有丝分裂的细胞或间期细胞内通过用染色体特异性探针的原位杂交产生染色体特异信号。

2、标记个体人染色体的方法，在有丝分裂的细胞或间期细胞内通过用染色体特异性探针的原位杂交产生染色体特异信号。

3、产生个体人靶染色体高度特异性染色的方法，包括原位抑制标记DNA探针的杂交，该探针对人有丝分裂的细胞或人间期细胞中的染色体DNA是特异性的。

4、根据权利要求3的方法，其中DNA探针是选自以下一组：全重组体文库DNA、由染色体产生的重组体DNA文库纯化的DNA插段，以及来自染色体的特异性DNA片段。

5、根据权利要求4的方法，其中标记的DNA探针选自以下一组：至少用一种荧光染料标记的DNA探针;至少用特异性结合对的一个成员标记的DNA探针;以及用酶标记的DNA探针。

6、根据权利要求5的方法，其中的荧光染料选自以下一组：荧光素，若丹明，得克萨斯红，金星（Lucifer）黄，藻胆蛋白和花青染料，而特异结合对的成员是生物素。

7、用染色体原位抑制杂交确定人细胞染色体畸变的方法。

8、根据权利要求7的方法，其中人细胞选自中期细胞、前期细胞和间期细胞。

9、检测人非整倍体细胞中染色体畸变的方法，包括：

a）在适于使互补的核酸顺序发生杂交的条件下结合

1）经过处理的人非整倍体细胞，使之产生适于与互补核酸顺序杂交的核酸顺序，和

2）杂交混合物，它含有来自特异染色体的标记的人探针;竞争DNA;和非人基因组DNA;以及

b）检测与非整倍体细胞的核酸顺序杂交的来自特异染色体的标记的人DNA。

10、根据权利要求9的方法，其中非整倍体细胞是人肿瘤细胞。

11、根据权利要求10的方法，其中人肿瘤细胞选自：中期细胞、前期细胞和间期细胞。

12、根据权利要求10的方法，其中人肿瘤细胞是人神经胶质瘤细胞。

13、检测存在于试样中的人染色体数目改变的方法，包括：

a）在适于使互补的核酸顺序发生杂交的条件下结合

1）经过处理的试样，使之产生适于与互补的核酸顺序杂交的核酸顺序;和

2）一种杂交混合物，它含有来自选择的染色体的标记的人DNA;竞争DNA;和非人基因组DNA;和

b）检测与存在于试样中的核酸顺序杂交的来自选择的染色体的标记DNA。

14、根据权利要求13的方法，其中选择的人染色体是选自以下染色体：13、18、21、X和Y。

15、根据权利要求13的方法，其中选择的人染色体是染色体21，而来自选择的染色体的标记的人DNA是由染色体产生的重组DNA文库纯化的DNA插段。

16、测定人肿瘤细胞中选择的染色体或其部分的过量或不足的方法，包括如下步骤：

a）在适于使互补的核酸顺序发生杂交的条件下结合

1）处理的人肿瘤细胞，使存在于细胞中的核酸顺序适于与互补核酸顺序杂交;和

2）一种杂交混合物，它含有来自选择的染色体的标记DNA片段;竞争DNA;和非人基因组DNA;和

b）检测与肿瘤细胞核酸顺序杂交的标记的人染色体特异性DNA片段。

17、鉴定存在于选择的哺乳动物染色体中的染色体特异性DNA的方法，包括：

a）在适于使互补的核酸顺序发生杂交的条件下结合以下物质：

1）选择的哺乳动物染色体;

2）具有可探测标记的来自哺乳动物染色体的DNA片段;

3）竞争DNA;和

4）载体DNA，

以形成具有可测标记DNA片段和选择的哺乳动物染色体的复合物;和

b）检测步骤（a）中形成的复合物。

18、根据权利要求17的方法，进一步包括：通过分离步骤（a）的剩余顺序形成的选择复合物，以分离选择的哺乳动物染色体中的染色体特异性DNA。