[发明专利]溶剂萃取林可霉素的方法

说明书

本发明属于溶剂萃取抗菌素的方法。

在溶剂萃取林可霉素的方法中，最常用的较成熟的方法是丁醇溶剂萃取工艺（见《抗菌素生产工艺学》华东化工学院、沈阳药学院合编，1982年5月）。但该方法采用丁醇作萃取剂，它与水有互溶现象，在20℃时，水溶液溶解丁醇的量为79克/升，因此每次循环后，丁醇损失量很大，这不仅造成溶剂的大量损失，而且也严重地影响了林可霉素的回收率，为了回收丁醇需耗大量能源蒸馏萃余相。此外丁醇是用粮食发酵而制得，需耗大量的粮食。丁醇对杂质的选择性也较差，为了去除杂质，需采用较长的工艺过程，增加了生产周期。在US4271266中公开了采用树脂法生产林可霉素的方法，此法处理量小，生产周期长。在CN87106079中公开了用中性磷酸酯在偏碱性介质中萃取林可霉素，但中性磷酸酯价格昂贵，生产成本高。

本发明的目的是提供一种工艺简单，回收率高，成本低的溶剂萃取林可霉素的方法。

本发明采用辛醇（有正辛醇、仲辛醇、异辛醇）作萃取剂，辛醇是长链醇、不溶于水，因此溶剂几乎不损失，回收率大大提高，从而降低了生产成本。辛醇对杂质如蛋白、醣和无机盐（如Fe，Ca.Mg.K.P等）几乎不萃取，可以减少纯化过程，简化了工艺流程。此外辛醇价格低廉、来源容易。如仲辛醇是葵二酸生产的副产品，其价格是丁醇的六分之一，是中性磷（如TRPO）的六十到七十分之一。

本发明萃取林可霉素的工艺过程如下：

萃取：有机相辛醇与水相林可霉素发酵滤液萃取的相比O/A＝1～1/7，萃取温度在10～60℃，林可霉素的含量为2000u/ml以上，pH为7.1～14。

反萃取：萃取液用盐酸反萃取，盐酸浓度为0.1～0.5M，反萃液pH为2～3。

经反萃取后的反萃液进一步精制后即可获得产品盐酸林可霉素。

下面是本发明的实施例。

实施例一.

本实施例采用的林可霉素的产生菌是链霉素4～1024。该菌种在培养基中经三级发酵，发酵液酸化至pH为3左右，然后过滤，所得的林可霉素发酵滤液即可用来提取。发酵滤液中含林可霉素3892u/ml，用NaOH调pH至12.2，萃取剂采用工业级仲辛醇，发酵滤液与仲辛醇在混合室为40ml的七级混合澄清器中萃取，温度为22～24℃，流量比O/A＝1/3，萃取后的萃取液用水洗涤一次，O/A＝5/1;经水洗后的有机相再用0.2M的盐酸反萃取，所得反萃取液的pH为2.5，用NaOH调pH至5，再用1.5%（W/V）活性炭脱色，脱色后再用8倍体积的丙酮进行盐析结晶，冷藏8小时以上，过滤后的晶体在真空干燥器（50℃）干燥8～10小时，晶体即为盐酸林可霉素。

实施例二.

林可霉素发酵液来源和萃取，反萃取设备同实施例一。发酵滤液中林可霉素含量为3027u/ml，用NaOH调pH至7.4，萃取剂采用化学纯仲辛醇、萃取温度为12～15℃，流量比O/A＝1/4，单级萃取停留时间为8分钟，萃取后的萃取液用水洗涤一次，O/A＝2/1;经水洗后的有机相再用0.5M的盐酸反萃取，反萃取单级停留时间为4分钟，反萃取液的pH为2，其精制过程同实施例一。

实施例三.

林可霉素发酵液的来源，萃取设备和反萃取设备同实施例一。发酵滤液中林可霉素含量为2084u/ml，用NaOH调pH至9.5，萃取剂采用工业级仲辛醇，单级萃取停留时间为14分钟，萃取温度为50℃，流量比O/A＝1/6，萃取后的萃取液用水洗涤一次，O/A＝1;经水洗后的有机相再用0.1M盐酸反萃取，反萃取单级停留时间10分钟，反萃取液pH为3，其精制过程同实施例一。

上述三个实施例的林可霉素总回收率达80%以上，所得产品符合CP85，BP80版的标准。

本发明的萃取剂不仅可用于提取林可霉素，亦可用于提取红霉素、麦迪霉素和白霉素等碱性抗菌素。