[发明专利]梅花离体快速繁殖方法

说明书

本发明涉及本花卉快速繁殖方法，不涉及植物品种。人们借助一种基本培养基和附加的植物激素组合对梅花进行离体快速繁殖。

在现有技术中，未见到梅花离体快速繁殖法，经发明人检索也未发现有关的报道。在木本花卉中仅有月季、杜鹃等少数种已实现快速繁殖，李属（PRUNUS）植物虽有近30种通过离体培养获得再生植株，但都没有实现快速繁殖。现常规梅花嫁接在自然条件下从育苗到成苗至开花时间长（6-7年），植株抗逆性差，寿命短，开花部位高，不利造型，产品体积大，不易经销。

本发明的目的在于提出一种改进的快速繁殖方法，缩短了梅花育苗到成苗至开花时间，为我国传统名花-梅花的优良品种和珍贵野生型的工厂化生产，并形成盆栽（或盆景）的高档外向型商品梅花开辟了途径。

本发明的特征在于，采用低无机盐浓度的自配培养基，植物激素组合为复方，外植体采用成年母树腋芽。

在本发明提出的方法过程中，采用成年母树外围带花蕾枝条，切成15-20厘米长度插穗，不经植物激素处理，按常规插于温室砂床，待芽萌动则采腋芽作外植体，在无菌条件下，用小刀刮除外层鳞片，用70%的酒精消毒3分钟，再用0.1%的升汞溶液消毒5分钟，用无菌水冲洗4次后进行接种。将配好的培养基用100毫克锥形烧瓶分装（每瓶装40-50毫克），经高温（120-125℃），高压（1.1KG/CM²）消毒冷却后在超净工作台上接种。每组合3-5瓶，每瓶5个外植体。接种后将培养物置于培养室静培养。培养室温度控制在（22-28℃），用日光灯作光源，光照强度为1000-2000LUX，每日光照12小时。初培养，基本培养基附加高浓度的植物细胞分裂素与较低浓度的植物生长素组合诱导单芽长成丛生芽;对丛生芽进行继代培养，则将丛生芽块转移到基本培养基和附加植物激素上继代培养，每瓶培养物可长出4-6株粗壮的无根苗，对无根苗诱导生根，继续用自配的培养基和附加的植物激素培养，25天 后每株从茎部长出2-6条粗壮的根，当小株根长到1-1.5厘米时，便从培养基中取出，经自来水清洗后，移裁盆土中，置温室养苗，待植株长到15-20厘米时再移到室外管理。

本发明快速繁殖的方法，育苗到成苗至开花时间较短（2-3年），植株具有抗逆性强，寿命长，开花部位好，便于造型，产品体积小，易于经销，利于商品化生产。

图1：腋芽分化的丛生芽

图2：继代培养的幼苗

图3：诱导幼苗生根苗

图4：梅花两年生试管植株花枝

实施例：

采用低无机盐浓度的培养基有下列成份组成，硝酸铵（NH₄NO₃）1200-1400毫克/升、硝酸钾（KNO₃）300-500毫克/升、氯化钙（CaCl·2H₂O）150-300毫克/升、硫酸镁（MgSO₄·7H₂O）40-100毫克/升、磷酸二氢钾（KH₂PO₄）200-400毫克/升、磷酸二氢铵（NH₄H₂PO₄）50-100毫克/升、硫酸氩铁（FeSO₄·7H₂O）13.9毫克/升、乙二胺四乙酸二钠（Na₂EDTA）18.6毫克/升、碘化钾（KI）0.83毫克/升、硼酸（H₃BO₃）3.1毫克/升、硫酸锰（MnSO₄·H₂O）8毫克/升、硫酸锌（ZnSO₄·7H₂O）8.3毫克/升、钼酸钠（Na₂MoO₄·2H₂O）0.25毫克/升、硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.25毫克/升、氯化钴（COCl₂·6H₂O）0.025毫克/升、肌醇50毫克/升、烟酸0.5毫克/升、甘氨酸1毫克/升、盐酸硫胺0.5毫克/升、盐酸毗哆素0.5毫克/升、蔗糖20毫克/升、琼脂5.5毫克/升、PH5.8，在附加植物激素BA2毫克/升、ZE1毫克/升、IAA0.2毫克/升的培养基上外植体培养25天分化出丛生芽。继代培养，将丛生芽块转移到附加植物激素BA0.025毫克/升、IAA0.5毫克/升的培养基上，20天后瓶内培养物长出3-5株粗壮的无根苗。再对无根苗诱导生根，把无根苗转移到附加植物激素NAA0.05毫克/升、BA0.025毫克/升的培养基上，20-25天后瓶内小株从茎基部长出2-5条粗壮的根，小植株的根长到1-1.5厘米时从培养基中取出，经自来水（或清水）清洗后，直接移裁到盆内培 养土中，置温室养苗，当植株长到15-20厘米后再移到室外管理。[春秋季节移裁后15-20天后长出新的茎叶，冬季采用大口径花盆盛培养土密集移裁小植株，置培养室或温室加温（15-25℃）养苗，成活率均为80%以上]。在适宜的盆裁条件下2-3年生植株便可着蕾开花。