[发明专利]从人工流产物中提取人绒毛膜促性腺激素方法

说明书

本发明是涉及从人工流产物中提取人绒毛膜促性腺激素（HCG）的方法。

HCG是分子量约为30000-40000的糖蛋白性激素，它能刺激性腺活动，对雌性可促使卵胞成熟及排卵功能，对雄性可促使细精管功能及间质细胞活动，增加雄性素产生，促使睾丸下降，可治疗神经衰弱，习惯性流产，严重子宫出血，闭经，不孕症等。

现在国内外人们提取HCG是从孕妇尿中提取，如日本专利昭60-45852介绍从孕妇尿中提取HCG的方法，该方法的优点是提取率高，但缺点是原料收集困难，而且HCG的含量低，每立升尿含量约4万国际单位。

本发明的目的是提供一种从人工流产物中提取HCG的方法。本法的优点是原料来源和收集比较容易，在医院或妇科医院都比较容易收集到，提取方法简单，而且HCG含量高，一立升人工流产物可提取HCG60-100万国际单位。

本发明的方法包括初提液提取和HCG成品提取二步：

第一步  初提液的提取（见图1）

将人工流产物过滤，得到滤液A和固体物，把固体物研磨加入生理盐水，或者蒸馏水，或者低级醇水溶液或可溶性盐的水溶液浸泡搅拌20-60分钟，再过滤，并洗涤滤渣，得到滤液B，上述滤液A和滤液B都是HCG含量很高的初提液（见附表）。

第二步  提取HCG成品（见图2）

将上述滤液A和滤液B混合，加入适量蒸馏水，用20%的NaOH溶液，调PH至8.5，加入适量的硅藻土作为助滤剂，经搅拌过滤，滤液中加入冰醋酸，调PH至4.0，再加入吸附剂人造沸石搅拌，放入冰箱4℃冷藏8-16小时，静止分离，倾析上清液，抽滤用蒸馏水洗涤，再用乙醇洗涤，得到沉淀物，用下列方法处理。（1）用2N-氨水或2N-碳酸钠水溶液洗提、过滤，洗提液用冰醋酸调PH至5.0离心分离，离心液加入硫酸铵使HCG沉淀，经离心、分离、抽干，获得HCG成品;（2）用含40%的乙醇，10%醋酸铵溶液洗提，过滤，滤液加入4倍量95%乙醇使HCG沉淀，经离心分离，真空抽干，获得HCG成产。

实施例一（提取初提液）

取60天人工流产物10份，1800ml（含水）过滤后，得到滤液A，用放射免疫检验，测得其中HCG为864000国际单位;过滤后的固体物500克，经研磨，加2000ml生理盐水浸泡，搅拌60分钟，过滤，用生理盐水洗涤滤渣2-3次，含并滤液和洗涤液得到滤液B，去掉滤渣用放射免疫检测其中HCG含量约480000国际单位，合并滤液A和B获得含1344000国际单位HCG的初提液。

实施例2（初提液提取）

取70天人工流产物10份，1250ml（含水），过滤后，得滤液A，检测其中HCG含量540000国际单位，过滤后的固体物600克，经研磨，加蒸馏水浸泡，搅拌60分钟，过滤，再用蒸馏水洗涤滤渣3次，合并滤液洗涤液得滤液B，检测其中HCG含量为480，000国际单位，合并滤液A和滤液B共得含HCG1020000国际单位的初提液。

实施例3（提取HCG成品）

取初提液A1250ml，加10升蒸馏水，在搅拌中加入20%NaOH溶液，调PH至8.5，加入硅藻土50克，压滤，用蒸馏水洗涤滤渣，合并滤液和洗涤液，搅拌中加冰醋酸调PH至4.0，再加人造沸石150克，搅拌2小时，冷藏静止10小时，倾析上清液抽滤，用蒸馏水，乙醇依次洗涤沉淀物，再用2N-氨水洗提沉淀物，过滤后，滤液用冰醋酸调PH至5.0，除去沉淀，加50%硫酸铵溶液，使HCG沉淀，经离心分离，真空抽干得HCG产品。

实施例4

取实施例2中的初提液A和B共3000ml加10升蒸馏水，在搅拌中加入20%NaOH溶液，调PH至8.5，加入硅藻土100克，压滤，用蒸馏水洗涤滤渣，合并滤液和洗涤液，搅拌中加冰醋酸调PH至4.0，加入人造沸石200克搅拌2小时，冷藏静止10小时，倾析上清液，抽滤，用蒸馏水、乙醇依次洗涤沉淀物，用含量40%乙醇和10%醋酸铵溶液洗提沉淀物，过滤后，在滤液中加4倍量95%乙醇使HCG沉淀，经离心分离、真空抽干得HCG产品。

采用本发明方法提取HCG的优点是，原料来源和收取比较容易，方法简便易行，HCG的提取率高，含量高，10份人流物可提取HCG100万-130万国际单位。