[发明专利]一种促进微生物快速增长的促菌生长剂的制备方法

说明书

本发明涉及一种生物、医学等领域中使用的，能使微生物快速生长的促菌生长剂的制备方法。

目前在生物、医学领域中，对微生物的分离、培养与鉴定，往往需要较长时间，如肠道致病菌的分离培养，一般需培养18小时以上，才能形成1mm以上的菌落，然后挑选可疑菌落做细菌学诊断，因此有必要研究一种菌落快速增长的方法。近十年来，在分离培养方面，沙门氏菌、痢疾杆菌虽研制了一些新培养基，但培养时间并未缩短，副霍乱弧菌的培养也是如此。到目前为止，尚没有一种能促进微生物快速增长的方法。

本发明即是根据已有技术不能解决的问题，而提出的一种能促进微生物快速生长的促菌生长剂的制备方法。此促菌生长剂加至微生物培养基中，能实现微生物的快速生长、缩短培养时间、提早作出诊断并能提高检出率。

下面将详述一下本发明的目的是如何实现的：

本发明所述的一种促进细菌快速增长的促菌生长剂的制备方法如下：将新鲜韭菜去腐叶、洗净，略沥其水，切段后称重，加蒸馏水，煮沸，煮液用多层纱布过滤，挤出渣中液体合并至滤液中，调PH值为中性7.0～7.2，加蒸馏水补充至原量，即为粗制品，本粗制品加热至煮沸，缓缓加入活动炭，边加边搅拌，作用后的液体用滤纸在同一漏斗中过滤2次，加蒸馏水补充至原量即成精制液。

在上述制备方法中，韭菜切段称重后加蒸馏水，其浓度为20%～60%之间，此液煮沸，煮沸持续时间为20分钟至1小时

粗制液加热至煮沸，趁热缓缓加入1%～4%的活性炭，边加边搅拌，其作用时间控制在5～10分钟。活性炭作用过的液体在同一漏斗中反复过滤二次，此时滤液呈透明浅黄色，加蒸馏水补充至原量，即为精制液。精制液经高压灭菌或加入0.5%氯仿防腐置冰箱内保存备用。

使用时，将本促菌生长剂的精制液加水3～10倍稀释后，代替蒸馏水配置培养基即可。

用本发明所述的方法制备的促菌生长剂加入常规培养基中培养微生物与常规方法相比有着明显的促进细菌生长，缩短培养时间的效果。在霍乱弧菌、沙门氏菌、痢疾杆菌的常规培养基中，加入10%的韭菜水煎液配制的平板，ElTor弧菌经8小时培养的菌落相当于对照培养基上10小时的结果，添加促菌生长剂的鉴别培养基培养沙门氏菌、痢疾菌、培养12小时生长的菌落可达1mm或1mm以上，相当于常规培养基上18小时生长的菌落，缩短了1/3时间，临床标本标出率亦不低于常规方法。在液体培养基中添加此种促菌生长剂细菌增殖的效果非常显著。可见用本发明所述的方法制备促菌生长剂是一种在生物、医学领域中很有实用价值的方法。

下面将列举一个本发明的实施例，以充分支持本发明目的实现方法。

用新鲜韭菜去腐叶、洗净，略沥其水，切成约2cm长的段，称重后加蒸馏水，使韭菜浓度为5%。此液持续煮沸半小时，煎液用四层纱布过滤，挤出渣中液体合并，调PH值至7.0，加蒸馏水补充至原量，即得粗制液。将粗制液加热煮沸，趁热加入2%颗粒活性炭，边加边搅拌，作用5分钟左右，活性炭作用后的液体用滤纸过滤，在同一漏斗中反复二次，加蒸馏补充至原量，即为精制液。精制液经高压灭菌后保存，使用时，用蒸馏水稀释5倍，即成10%韭菜提取液。用此提取液代替蒸馏水制做培养基即可用做细菌培养。