[发明专利]用于抑制非癌性细胞增生的DNA构件的制备方法

说明书

本发明涉及到一种治疗细胞增生性疾病的方法，它包括向增生细胞中插入一种抑制性生长调节(NGR)成份。

导致细胞非正常局部增生的病理状况是人体疾病的一种常见病因。人体良性疾病不同于恶性疾病(癌症)的基本点在于，良性疾病不能够从人体的一个部位扩散到另一个部位，以及它们的生长速度一般较缓慢。两种疾病都可以导致死亡，失明和致残。膜部术后的内部粘连和疤痕形成这些不利因素可以导致肠道狭窄和坏死。糖尿病患者眼内新生血管的非正常生长可以引起失明。良性神经纤维瘤可以引起毁容。像牛皮癣这种皮肤病是一种其他正常细胞的异常增生所导致的终生消耗性疾病。许多不同的人体疾病都可以归于这种类型。

由于细胞异常局部增生引起的疾病可以总称为良性增生疾病(BPD)。如果增生细胞以成纤维细胞为主，这一类疾病的亚分类称之为“纤维增生性”疾病。如果增生细胞是血管内皮细胞(存在于血管内表面的一种细胞类型)为主，则亚分类称之为“血管增生性”疾病。上皮细胞的异常增生可引起严重的皮肤病。目前，这些良性增生性疾病的治疗通常是用手术、放疗、和/或化疗中的一种或几种方法进行组织摘除。这些治疗方法一般对正常和病理组织都有损伤。其他的局部疗法，如激光或局部冷冻疗法，很少获得成功。

对于细胞增生的控制是一个复杂的过程，人们只是在近些年来对此开始有所了解。细胞的生长与否取决于抑制性和促进性生长成份表达的平衡。抑制性生长调节(NGR)成份是那些当将其在细胞中表达或提供给该细胞时可以抑制细胞生长的成份。促进性生长调节(PGR)成份一般是那些当将其在细胞中表达或提供给该细胞时刺激细胞增生的产物，或基因及基因产物。

抑制性生长基因的表达在调节和控制细胞增生过程中起着重要的作用。NGR成份的一些例子是已经识别出的在静止的或体眠状态的细胞中诱导表达的一些基因。这些基因可以命名为抑制性生长调节(NGR)基因。降低这些抑制性生长调节(NGR)基因的调节功能可以取消对细胞增生的抑制。除了某些生物或生理现象可以引起这些基因或基因产物的失活外，已经识别出在某些病理状况中抑制性生长调节基因失活或缺乏。这些基因的失活可能由于该基因的缺失、突变或调节功能低下所致，或者是由于结合该基因产物或使之失活的某种因子过盛，从而部分或全部地阻止该基因的表达或其产物的功能，并且因此阻止了其阻遏或限止细胞增生的能力。

最近，识别出了几种对肿癌细胞增生有抑制作用的称之为肿瘤抑制因子基因的NGR基因。这些基因包括，但不局限于，人视网膜神经胶质瘤基因Rb-1，P53基因，DCC基因，NF1基因，维尔姆斯瘤基因，NM23基因，甲状腺激素受体基因和视黄酸受体。这些抑制生长调节基因中某些基因的缺失或失活已经与某种类型的肿瘤联系起来。

人体视网膜神经胶质瘤基因，Rb1，是这类肿瘤抑制因子基因(本文称之为抑制性生长调节(NGR)基因)的原型，在细胞中该基团的两个等位基因的缺失或该基因或基因产物表达的抑制可以引起肿瘤或异常的细胞增生。已经在分子水平上证实RB1基因的两个等位基因的缺失或失活存在于临床表现肿瘤如视网膜神经胶质瘤，和临床相关肿瘤如骨肉瘤、纤维肉瘤、软组织肉瘤和黑素瘤中。

另外，Rb-1基因功能的丧失也与其他类型的原发肿瘤如未分化小细胞肿瘤(SCLC)，软组织肉瘤，乳腺癌，宫颈癌和前列腺癌有关。

向失去Rb-1基因的肿瘤细胞中导入Rb-1基因可以引起肿瘤生长的抑制。例如，当向失去内源性Rb基因的骨肉瘤细胞系SAOS2和前列腺癌细胞系DU145肿瘤细胞导入Rb-1的cDNA时，这些肿瘤细胞中的某些细胞生长在体内受到特异性抑制(Huang et al.，(1988)Science 242：1563；Bookstein etal.，(1990)Science 247：712)。这些研究者得出结论，当用视网膜神经胶质瘤基因特异性抑制肿瘤基因表现型时，对于正常细胞没有影响。