[发明专利]6-（取代氨基）嘌呤促细胞分裂素在制备抗衰老组合物中的用途

说明书

本发明涉及改善哺乳动物细胞衰老的不良效应而不提高细胞生长率或总的增殖能力的方法。

更准确地说，本发明涉及使用已知化合物——激动素(N⁶-呋喃甲基腺嘌呤)或其它6-(取代氨基)嘌呤促细胞分裂素，来制备对抗培养中的或活体哺乳动物细胞(包括人的皮肤细胞)衰老不良效应的组合物。

预防细胞的衰老过程尽管难以捉摸，然而却是生物科学的一个持久的目标。预防衰老过程将取得一些重大的、实际的结果。例如，如果培养中的细胞保持年轻细胞的特性，则可改善从这些细胞制备有用产物的过程。同时，防止人皮肤或其它器官细胞的衰老将是有重要价值的，因为它与保持结构和功能完整有关。对于皮肤，改善细胞衰老的不良效应也将有利于保持美容的完整。

区别年轻和衰老细胞的一些特性现已得到确定，例如，发现处于标准培养中的年轻哺乳动物细胞(包括人成纤维细胞)显得健康和清晰；具有规则的细长纺锤状形态；在培养基质中紧密排列，融合；相互之间并不复盖，很少有一个以上核；在培养基中极少产生碎屑。另一方面，老的成纤维细胞显示很多与年龄有关的症状，例如变得扁平和形态不规则、体积异常大、生长稀疏、每单位面积培养基细胞产率低、多核细胞显著增多、胰蛋白酶作用困难及培养基中碎屑产生率高。年轻细胞区别于老龄细胞的形态学特征以及在老龄细胞上检出的高水平自身荧光反映了区别年轻细胞和衰老细胞的各种生理学和生物化学特性，包括年轻细胞对生长因子的高度反应性及较高的DNA和蛋白合成率。

从哺乳动物(包括人)的培养细胞(常用成纤维细胞)所作的研究，大量地确认了区别年轻与老龄细胞的形态学，生理学和生物化学特性。在这些研究中，以细胞数目倍增数来评估培养细胞的“年龄”，这种细胞倍增出现在从原代培养物(从组织制得)到由原代培养物得到或从原代培养物传代而来的发生关系的培养物中。

在培养细胞的研究中发现的区别年轻和老龄细胞的特性也适合于活哺乳动物体内存在的细胞，这些细胞与培养的成纤维细胞有很多共同的特性，例如相似的生化特性和严格的生长控制(即严格的增殖控制)。皮肤真皮层(即真皮)的成纤维细胞和胃肠道内壁上皮下结缔组织层是显示与培养的成纤维细胞相似老化性质的细胞实例。

活哺乳动物组织中的成纤维细胞在严格的生长控制下周期性地进行正常分裂，这种成纤维细胞的评估“年龄”是以哺乳动物出生时间前后在这些细胞及其亲代之间出现的细胞分裂数来衡量的。由于细胞分裂是周期性出现的，因此在以年月顺序计的哺乳动物年龄与以出生时细胞和其亲代细胞之间的细胞分裂来估测的特定细胞的年龄之间存在着特定的关系。

培养中的成纤维细胞的另一特性是细胞的“总增殖能力”。这是以培养物由于其中“衰老”细胞的死亡(生长和分裂停止)而停止生长前该培养物可经历的细胞数目倍增的总数来估测的。对于人成纤维细胞培养物来说，此总增殖能力典型地为初级培养物经约45-60次倍增。如现有技术中所了解的那样，培养物生长的停止出现得很快，仅仅在几次倍增后，生长速率(以倍增时间的倒数计)即从接近年轻细胞特有的正常值降为零。在正常成纤维细胞的培养物中，即其中细胞不转变为永久的或“癌的”状态，“总增殖能力”作为倍增数的函数而降低，使培养物与得到此培养物的初级培养物分开。与培养中的正常细胞的“总增殖能力”有关的其它术语有细胞的“估计寿命”和“正常生存期”。正常细胞的“估计寿命”或“正常生存期”是从中得到培养物(其中出现细胞)的初级培养物的“总增殖能力”。

正常成纤维细胞，特别是来源于人的正常成纤维细胞有一个限定得很窄(在几次倍增中)的培养物总增殖能力，这一事实表明这些细胞处于严格的增殖控制之下。有时，在正常情况下具有有限的总增殖能力的细胞可以发生转化而失去这一限制。这样的细胞的培养物有时可反复传代，在传代数目上没有任何明显的限制。这样的细胞被称作是永久的细胞。永久性是癌细胞的特征。癌细胞很少或几乎不处于增殖控制之下。

活哺乳动物体内细胞(如皮肤真皮层或肠上皮下结缔组织层的成纤维细胞)的总增殖能力不能象培养中的成纤维细胞那样，简单地根据固定的倍增数来估测，此倍增数限于哺乳动物种属特有的狭窄范围(例如，如上所述，人为45-60；鼠为10)。然而，显然活哺乳动物的这些细胞如果是正常的，它们就只有有限的分裂能力，并且处于严格的增殖控制之下。