[发明专利]苏云金杆菌杀虫剂生产工艺

说明书

本发明涉及微生物菌类杀虫剂的制备方法，特别是一种苏云金杆菌杀虫剂的生产工艺。

苏云金杆菌是一种杀虫微生物，其生物制剂已大规模生产，广泛用于防治农业害虫，林业害虫，贮藏害虫和环卫昆虫。由于苏云金杆菌的不同亚种、不同菌株，对昆虫的毒力有差别，其不同制剂对害虫的杀灭效果也不一样，所以，世界各国都致力于发现毒力强的苏云金杆菌菌株，并以适宜的工艺和剂型进行工业化生产，从而提高发酵效价和对目标害虫的防治作用。

本发明的目的是提供一种对粮棉、菜、林、果、烟、药、茶及花卉、牧草等多种植物的害虫防治效果好，施用方便的苏云金杆菌杀虫剂的生产工艺。

本发明的生产工艺是：以市售名为“BT-781”、属戈尔斯德变种，H_3a.3b血清型的苏云金杆菌菌株为菌种，将其砂土孢子30℃培养72小时，斜面孢子31±1℃培养12-15小时，通气量1∶0.7-1，搅拌速度每分钟240转，入罐发酵，前期发酵温度28-31℃，孢子囊明显形成后温度32-33℃，通气量每分钟1∶1.3-1.4，种子罐罐压0.04-0.05mpa，发酵罐罐压0.03-0.04mpa，搅拌每分钟220-240转，聚丙烯甘油聚醚消沫，20%芽孢晶体脱落时放罐，入酸化罐降温至25℃，加工业盐酸调PH5.5-6.6，离心机浓缩，控制活孢子的含量120亿/ml以上;将浓缩液顺序加入精盐5%，二甲苯0.2-0.4%，红油2%，每分钟180-200转搅拌60分钟成悬浮剂。

该工艺用1988年从高梁条螟染病幼虫体分离出、1980年经中国科学院分类鉴定、已在河北省高邑县生产销售的“BT-781”苏云金杆菌菌株为菌种，以上述工艺生产“BT-781”苏云金杆菌制剂，具有菌株毒力强，发酵工艺先进，效价高，收率高，制剂杀虫种类多，防治效果好，成本低，效益高等优点。

该生产工艺的制剂可以是将发酵浓缩液加磺酸钙、填充剂和农乳100、打浆、喷雾干燥后，低温粉碎成每克含活孢子300-500亿的高含量粉剂，以适应不同的使用要求。

以下是本发明的实施例。

实施例一，在无菌室内，将“BT-781”砂土孢子接种到斜面培养基上，置30℃恒温箱中培养72小时。斜面培养基配方：牛肉膏0.3%、葡萄糖0.3%，琼脂2.0%，用0.1N  NaOH调PH值为7.0-7.2，灭菌锅0.11-0.12mpa蒸汽消毒30分钟，斜面孢子在31±1℃，培养12-15小时，通气量：1∶0.7-1，搅拌速度每分钟240转，将种子液入15立方米发酵罐。发酵培养基配方：黄豆饼粉3.5-4.5%，鱼粉2-4%，淀粉1.5-2.0%，碳酸钙0.1-0.3%，硫酸镁0.03-0.05%，磷酸二氢钾0.01%，聚丙烯甘油聚醚消沫剂0.05%，豆油0.1%，用氢氧化钠调整PH值，消沫前PH8.4-8.6，消沫后PH6.8-7.0。前期发酵温度28-31℃，孢子囊明显形成后温度32-33℃，通气量每分钟1∶1.3-1∶1.4，种子罐罐压0.04-0.05mpa，发酵罐罐压0.03-0.04mpa，搅拌每分钟220-240转、发酵8小时后，泡沫上升较大时，利用补液管道滴加消沫剂控制泡沫。收率可达80%。20%孢芽晶体脱落时放罐。此时发酵单位含活孢子60亿/ml以上，将发酵液放入酸化罐，降温至25℃，加工业盐酸调PH5.5-6，用蝶片式分离机离心浓缩，弃上清液，控制浓缩液活孢子含量120亿/ml以上。将浓缩液顺序加入精盐5%，二甲苯0.2-0.4%，红油2%，每分钟180-200转搅拌60分钟成“BT-781”苏云杆菌悬浮剂，其PH值5.5-6.0，活孢子含量≥120亿/ml，悬浮率≥65%，抽测生物毒力，芽青虫1000倍液48小时，死亡率95%以上。

实施例二，将实施例1中的发酵浓缩液加磺酸钙，碳酸钙和农乳100，打浆、喷雾、干燥后，低温粉碎成高含量“BT-781”苏云金杆菌粉剂，其细度200目以下，含水量4%以下，含活孢子300-500亿/g，毒力8000-12000Iu/mg国际毒力单位。

“BT-781”悬浮剂和高含量粉剂生产成本低，使用成本低，经济效益十分明显。