[发明专利]苏云金杆菌防光乳剂生产方法

说明书

本发明涉及一种杀虫剂的生产方法，特别是一种苏云金杆菌防光乳剂生产方法，属微生物技术领域。

苏云金杆菌是一种微生物，用它制得的杀虫剂对鳞翅目等害虫有很大的杀伤作用，并且高效，药效期长，低残留，是一种理想的无公害微生物农药。CN1035843A公开了一种苏云金杆菌固体薄层保湿发酵的方法，这种方法受季节的影响大，劳动强度高，不适应于工业化生产。CN1043603A公开了一种苏云金杆菌颗粒混剂，这种方法制得的混剂，不仅含有难分解的化学杀虫剂-呋喃丹，残留期长，而且是以无任何杀虫作用的河沙为载体的，为颗粒状，只能洒施，药效低，应用面窄，防治范围受限制。CN1037172A公开了一种苏云金杆菌颗粒剂生产工艺，该方法生产工艺主要由棉籽饼备料，钭面培养，发酵罐用液体培养菌种，筛20-60目颗粒载体，混入苏云金杆菌培养基，蒸汽消毒，接种，装入培养池内培养，干燥后检查分装等工序组成，这种方法生产的产品含菌数低，为颗粒状，只能洒施、应用面窄。

CN1035843A公开的苏云金杆菌固体薄层保湿发酵法生产的产品、CN1043603A公开的苏云金杆菌颗粒混剂、CN1037172A公开的苏云金杆菌颗粒剂生产工艺生产的产品均要避光贮存。

本发明的目的在于克服现有技术的不足，而提供一种苏云金杆菌防光乳剂的生产方法，该方法能防止菌体自溶，发酵菌数高，周期短，收率高，产品可用透明容器盛装，药效强、药效长，产品为乳剂可喷施、应用面宽。

本发明目的是这样实现的：一种苏云金杆菌防光乳剂生产方法，包括菌种制备、发酵液制备、接种、发酵培养、发酵液加盐处理、分离浓缩、加入乳化剂、防腐剂、防光剂。

发酵液的制备是将120目以上的豆饼粉或花生饼粉、蛋白胨或鱼粉、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾、植物油或动物油或泡敌在通空气的同时拌入水中，所需物质的重量百分比为：

豆饼粉或花生饼粉  1.0-12%

蛋白胨或鱼粉  0.01-1.0%

淀粉  0.1-3.5%

酵母粉  0.1-1.0%

磷酸二氢钾或磷酸氢二钾  0.1-1.8%

植物油或动物油或泡敌  0.1-4.0%

发酵液的发酵培养是以种子液的发酵培养和发酵液的发酵培养两步完成的，第一步：以适量的发酵液接种后做种子液，在压力为0.04-0.05MPa、种子液（立方米）∶通气量（立方米/分）＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至对数盛期;第二步：将已发酵培养好的种子液注入发酵液中，在压力为0.04-0.05MPa、发酵液（立方米）∶通气量（立方米/分）＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至全部菌体形成老熟孢子囊，并有20-90%的芽晶的脱落。

发酵液的加盐处理是向已发酵培养好的发酵液中加入0.1-0.3%的盐。

防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为：

柠檬黄或日落黄  0.01-0.1%

明胶  0.1-10%

本发明所提供的苏云金杆菌防光乳剂生产方法能防止菌体自溶，发酵菌数高，周期短，收率高，产品可用透明容器盛装，药效强、药效长且为乳剂可喷施，应用面宽。

下面将结合实施例对本发明作进一步的详述：

菌种来源：自然病虫尸中分离、诱变筛选获得。

1、菌种制备：

a、茄瓶钭面培养基制备：将蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、琼脂加入茄瓶中的水中，PH值7.2，再经0.11MPa的蒸汽消毒30分钟后，冷却至55℃，将茄瓶钭置，茄瓶中的液体凝固后即为茄瓶钭面培养基，所需物质的重量百分比为：

蛋白胨  1%

牛肉膏  0.3%

葡萄糖  0.1-1.0%

琼脂  2%

b、菌种培养：将钭面培养基放入恒温箱中，经37℃、24小时试培养，观察无杂菌生长后，挑适量沙土管菌种，在无菌操作台上接入茄瓶钭面培养基，经37℃恒温培养17小时后，即在茄瓶钭面培养基表面长出菌苔。

c、菌种悬液制备：以无菌操作，先往茄瓶中加入适量无菌水，然后用接种环刮取菌苔装入悬液瓶中，即制成菌种悬液。

2、发酵液制备：将120目的豆饼粉、蛋白胨、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾、泡敌在通空气的同时顺序拌入发酵罐中的水中，所需物质的重量百分比为：

豆饼粉  1%

蛋白胨  0.1%

淀粉  0.1%

酵母粉  0.1%

磷酸二氢钾  0.1%