[发明专利]制备口服用活伤寒疫苗的培养方法

权利要求书

1.一种获得口服用活伤寒疫苗的培养方法，它包括：

i)在BHI培养基中培养得自伤寒菌株Ty21a的种子细菌；

ii)将培养的细菌悬浮于保护介质中，并在安瓿瓶中冰冻干燥，

iii)使冻干的细菌复活，并将复活的细菌接种于生长培养基中，

iv)在发酵罐中培养细菌，和

v)将所述细菌进行冰冻干燥并配成口服用的制剂；

其中步骤ii)中的保护介质由8％乳糖、1％羧甲基纤维素、5％脱脂奶、0.2％MgSO₄·7H₂O和1％谷氨酸一钠组成；步骤iii)中的生长培养基由37g BHI、5g L-赖氨酸、30g山梨醇、1.5g K₂HPO₄、0.5g MgSO₄和1升蒸馏水组成，pH调至7.0；步骤iV)中培养细菌的温度为i)头6个小时30℃，ii)接下来的2小时25℃和iii)最后14小时20℃。

2.根据权利要求1的培养方法，其中保护介质中的1％羧甲基纤维素由1％明胶代替。

3.根据权利要求1的培养方法，其中所述悬浮液在0-4℃下放置2小时后，对所述细菌进行冰冻干燥，在-70℃下冰冻2小时，在真空下干燥12小时。