[发明专利]诊断和识别胸痛早期发作的诊断盒

说明书

本发明涉及新的药板形式的一步诊断试验法，用来作为一种精确、简便、迅速和便携的诊断方法，以判断患者的胸痛是否源于心脏，并在患者胸痛的早期发作时区别出是易变性心绞痛还是心肌梗塞(“MI”)。特别是本药板用酶免疫试验夹层干化学形式同时测定了心脏受损伤时或损伤后血清或血浆中出现的三种不同的物质或标示物的水平。在本发明的优选的实施例中，这三个标示物是肌酸激酶(CK)，肌红蛋白和肌浆球蛋白轻链(MLC)。

心肌梗塞的紧急诊断取决于内科长征的敏锐性和对患者症状的评估，例如胸痛或胸压迫感，显可能放射到下到臂部，上到颈部，疲劳，要死的感觉，呼吸短促，苍白，皮肤冷湿，外周发绀或数丝状脉。

大多数北美的胸痛患者在发作6小时内报告给医生或急诊室。因此，在MI早期阶段进行有效的诊断试验是至关重要的。

有数种心脏检查方法用于诊察MI。这些检查方法包括ECG，SGOT/AST，LDH，CK-MB免疫试验和NA乳液肌红蛋白颗粒增强试验。然而还没有用单一酶心脏检查法能使急诊室医生确定胸痛是来自心脏或不是来自心脏的原因。而且只有在确证了是心肌梗塞后，才开始溶解血栓的治疗。这种治疗开始得越早，患者完全康复的可能性就越大或至少使心脏损伤只在最低程度。因此，内科先生确定这种疼痛是心脏性的还是非心脏性的，是至关重要的。

心电图(ECG)可用来诊察MI。然而只有心脏受到严重损伤时心电图才能诊断出。ECG的诊断特异性对开始阶段的胸痛只有51％。因此，ECG不适宜用于MI的早期诊察。

血清谷氨酸草酰乙酸转氨酶/天门冬氨酸转氨酶(SGOT/AST)在心肌中有高浓度，是占优势的酶。血清试验测定SGOT水平可用来诊断心肌梗塞。然而，SGOT只在胸痛发作后的大约8-10小时后才开始升高，在24-36小时内达到峰值，5-7天后恢复正常。患者在胸痛早期和紧急处置时SGOT在诊断心肌梗塞上是没有特殊帮助的。SGOT对心肌也不是特异的。已发现许多包含骨骼肌的组织，如肝和肾脏，由于肌肉注射，休克，肝脏病和肝充血时，SGOT被释放，因此这在诊察特异的心脏组织损害上价值不大。

乳酸脱氢酶(LDH)在许多组织中浓度很高，这些组织包括心脏，骨骼肌和肝脏，检查血清中LDH的存在的试验被用来诊断心肌梗塞。在五种普通的同型中心脏主要含有LDH1和LDH2。胸痛发作24-36小时后LDH水平开始增高，48-72小时后达峰值，4-8天后回复正常。因此，患者在胸痛早期不能用LDH作为MI的指标。此外对心脏损伤LDH不是特异的，在肺栓塞、溶血，肝充血，肾脏病和骨骼肌损伤时LDH会出现。这种特异性的缺乏降低了LDH作为诊断手段的应用。

肌酸激酶(CK)是肌肉组织中的一种酶。CK催化肌酸和三磷酸腺苷(ATP)转变为磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)的反应。CK的数个同功酶中的CK-MB在心脏组织中。CK-MB对诊查心肌梗塞是个灵敏的标示物，因为它在心肌组织受损伤时释放出。故而CK-MB存在于受损伤患者的血清之中，图1说明了患者血清中CK浓度与时间的关系(文献Lee T.H.等(1986)Ann.Intern.Med.105，221-233)。

CK-MB免疫试验是诊断心肌梗塞的标准检查法。美国专利No 4900662公布了CK-MB的应用方法，题目是“CK-MM心肌梗塞免疫试验”。

Shah在USP 4900662中公布了在患者心肌梗塞后测定血清中初始增高的CK-MM-a(CK-MM的异型)浓度和同时测定CK-MM-a和CK-MM-b的方法。用这个方法可提供一种对梗塞的时间的精确估计。该方法包括测定血清中CK-MM-a和CK-MM-b的总浓度和CK-MM-a的浓度，以确定心肌梗塞急性期的时间。公布的试剂包括有CK-MM-a的多克隆抗体和单克隆抗体，这类抗体并不明显地与CK-MB，CK-MM-b或CK-MM-c结合，有抗CK-MM-b抗体，它不会明显地与CK-MB，CK-MM-a或CK-MM-c结合，有抗CK-MM-a+b抗体，它可与CK-MM-a和CK-MM-b结合，但不能明显地与CK-MB或CK-MM-c结合，还包括这些抗体的标记的衍生物，固着这些抗体的不溶性的支持物，以及含有一种或多种这些试剂的药盒。酶标记的和放射性标记的CK试剂特别有用。

单独使用CK-MB作为诊断标示物是有些困难的。首先，心肌梗塞发作后只有在6-8小时后CK-MB的血清浓度才增高，而且12小时后才达峰，造成早期紧急诊断和治疗的困难。