[发明专利]用杀虫多肽防治害虫的方法

说明书

本发明与有杀虫效力的多肽有关。特别与如下有关：可从Diguetia蜘蛛毒分离到的有杀虫效力的多肽，编码这些有杀虫效力多肽的DNA，生产上述多肽的方法和控制无脊椎害虫的方法。

近年来，公众已经深刻地意识到与使用人工合成杀虫剂有关的环境危害和对哺乳动物的毒性。因此，这些杀虫剂的使用已经迅速地下降。然而，对有效昆虫控制的需要并末改变。这就促使研究人员去建立新的控制昆虫的方法。

最广泛使用的微生物杀虫剂来自细菌Bacillus thuringiensis(以后简称B.t.)。这种细菌制剂用于控制多种吃叶的鳞翅目幼虫。日本甲虫和蚊子。Karamata等1989年1月10日发表的美国专利号4,797,279阐明了含编码B.t.Kurstakiδ-内毒素的基因和编码B.t.tenebrionisδ-内毒素的基因的杂合细菌细胞以及它们的制备方法。这些杂合子能有效抵抗对B.t.Kurstaki品系敏感的害虫以及对B.t.tenebrionis品系敏感的害虫。一般来说，这些杂合子在杀虫力水平或杀虫力的范围或上述两方面具有有用的杀虫特性优于物理混合母代品系所观察到的结果。把含这些微生物的杀虫混合物以杂合子的有效杀虫量施于昆虫或它们的生存环境中就可以抵抗昆虫。

另一B.t.菌的衍生物发表于欧洲专利申请发行编号为0 325400 A1，属于Gilroy和Wilcox。这项发明与对鳞翅目昆虫有毒性的杂合毒性基因有关。特别地，此发明含有杂合的δ-内毒素基因。它有一部分的B.t.var.Kurstaki HD-73毒素基因和一部分的B.t.var.Kurstaki品系HD-1的毒素基因。此发明阐述了这种编码有抗鳞翅目昆虫活性蛋白的杂合毒素基因(DNA)。

欧洲专利申请发行号0 340 948(属于Wilcox等)，也应用了B.t.菌的杀虫特性。此发明涉及杂合杀虫毒素，它们是为了制备具抗鳞翅目昆虫活性的杂合B.t.毒素而把昆虫肠表皮细胞识别B.t.基因区域与鳞翅目毒素B链融合而产生的。发明指出也许能用这种杂合B.t.基因插入植物中或克隆进棒状病毒中来产生可回收的毒素。或者，这种含杂合B.t.基因的宿主可作为杀虫剂，直接施于靶昆虫的生存环境中。

在寻找杀虫复合物的过程中，蝎子毒被认为是一种可能的具杀虫特性复合物的来源。两种昆虫选择性毒素已从蝎子Leiurusquingquestriatus quinquestriatus毒液中分离出来，由zlotkin等发表在Arch Biochem and Biophysics，240：877-87(1985)，题目为《蝎毒中激活性和抑制性昆虫毒素都影响钠传导并有共同的结合位点》。有关它们的化学和药理性质研究表明一种毒素诱导蝇幼虫快速的激动收缩麻痹，另一种毒素诱导慢速抑制松驰麻痹。两者都影响钠传导。

加拿大专利2,005,658，由Zlotkin等1990年6月19日发表，阐明了一种来源于蝎子Leiurus quinquestriatus hebraeus Buthi-nas，Buthidae的有效杀虫蛋白。这项发明中毒液被冻干并分部分离。对幼虫有最高毒性且对鼠有最低毒性的那部分被进一步纯化，最终产物称为“Lqh P35”。

Grishin(Shemyakin Institute of Bioorganic Chemistry，USSRAcademy of Seiences，Moscow 117988，GSP-1，USSR)发表的《Buthus eupeus和Lucosa singoriensis毒液中的毒素成分》揭示了四种从蝎Buthus eupeus毒液中分离到的昆虫毒素。文章还阐述了塔兰图拉毒蛛Lucosa singoriensis毒液中毒素成分的分离和鉴定。原毒液对昆虫是无毒的。