[发明专利]将外源物质大量导入活细胞的方法

权利要求书

1、一种将外源物质导入活细胞的方法，其特征是将细胞在高渗缓冲液中浸泡20分钟以上，最佳时间为1--5小时，然后将该细胞转入含有外源物质的普通培养液，尽快使用物理方法使细胞壁穿孔，外源物质就大量进入细胞内。

2、根据权利要求1所述方法，其特征是配制高渗缓冲液使用对细胞无毒的糖醇类分子，通式为C₈H_12-14O₆或C₁₂H₂₂O₁₁，采用Tris-盐酸缓冲液或磷酸缓冲液，pH5.6-7.5。

3、根据权利要求2所述的方法，其特征是糖醇类分子，最好使用葡萄糖、肌醇、甘露醇、山梨醇、蔗糖等。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征是预导入活细胞的外源物质主要指通过分子克隆手段分离得到的各种基因。

5、根据权利要求1所述的方法，其特征是所说物理方法是激光微束照射，用基因枪加速的金属微粒，超声波，高压电击法。

6、根据权利要求5所述的方法，其特征是激光微束照射输出波长为1060nm、532nm、355nm和266nm，脉宽10ns，激光在532nm时输出能量为10mJ。