[发明专利]细胞照射装置及其方法无效
申请号: | 92109592.9 | 申请日: | 1992-08-17 |
公开(公告)号: | CN1040457C | 公开(公告)日: | 1998-10-28 |
发明(设计)人: | 兰迪·L·施廷森 | 申请(专利权)人: | 兰迪·L·施廷森 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12N13/00 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 马铁良,肖掬昌 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 照射 装置 及其 方法 | ||
本发明涉及流体照射装置,具体涉及一种允许使用紫外线光源照射细胞的装置。
目前已有一些内科研究人员将细胞移植入不同源的接收体中,试图治疗一些特殊的内科疾病和病症。为使这样的细胞移植获得成功,需要对被移植细胞对抗原的表现和/或识别进行免疫抑制,这样才能克服人体排斥不同源细胞移植的自然倾向。
用以对外源细胞的抗原表现和识别进行免疫抑制的一种普遍的公认的方法是用紫外线照射细胞。H.Joachim Deeg的题为“移植生物学中的些紫外光照射”(1988年5月,●第45卷,第5期的“移植”杂志,第845-851页)一文论述了紫外辐射在细胞移植方面的应用。
其它一些文章也介绍了用紫外线照射受移植细胞的具体方法。例如,有一种方法是将血液在磷酸盐缓冲溶液中稀释之后放入皮氏培养皿中用紫外光照射20分钟。紫外光源距皮氏培养皿特定的距离安置。然而,采用这种方法的实验不一定都是依然在光源距皮氏培养皿同一距离下进行的。Hardy,M.A、Lau,HT、Weber,C、Reemtsma,K,:“胰岛移植:用紫外线照射改变免疫性能”,1984年4月第8卷第2期的《世界外科杂志》第207-213页。Hardy,M.A、Lau,H.、Reemtsma,K.:“无需免疫抑制,用紫外线照射法延长老鼠胰岛的同种异体移植”,1984年6月第16卷第3期的《移植学报》第865-869页。
另一种方法是将血小板悬浮在溶液中,放入敞开的皮氏培养皿中达1.5毫米的深度,然后边抖动边用紫外光照射。Slichler,S.J.、Deeg,H、J.、Kemmedy,M、S.:“用内吸性环孢菌素并借助于紫外线照射或给血小板的给予体加环孢菌素来抑制狗的血小板异常免疫能力”1987年2月第69卷第2期的“血液”杂志,第414-418页。
再一种方法是将用韦茅斯最少介质(Waymouth′s mimimal medium)稀释过的全血放入皮氏培养皿达1.5毫米的厚度,然后将此悬浮液用紫外光照射30分钟。Drrg,H.J.、Aprile,J.、Graham,T.C.、Appelbaum,F.R.、Storb,R.:“用紫外光照射血液可以防止狗因输血引起的过敏和对骨髓移植物的排异反应”1986年2月第67卷第2期的《血液》杂志,第537-539页。
除上面所说的以外,另外一些关于用紫外光照射细胞的文章都已发表。例如,可以参看Lindabl-Kiessling,K,Safwenberg,J.的“紫外线照射过的淋巴细胞并不能刺激混合淋巴细胞培养液中的同种异体细胞”,1971年第41卷的《Int.Arah.Allergy》杂志,第670-679页;Balsh,J.D、Francfort,J.W.、Perloff,L.J.的”紫外线照射对输血效应的影响”,1985年8月的《外科学》第243-249页;Lau,H.、Reemtsma,K.、Ifardy,M.A.的“用紫外线直接照射老鼠胰岛的同种异体移植物来延长该移植物的寿命”,1984年2月10日第223卷的《科学》杂志,第607-609页。
从上述诸文章,显然不难看出,目前移植和输血有关的过程所使用的紫外光照射的方法存在一些有待改进的缺陷。特别是,目前所使用的各种方法都不统一。事实上,这些方法的性质是即使个别的试验过程也很难保持统一。举例说,由于各种方法是将细胞悬浮液放在皮氏培养皿中然后加以照射,因而只有保持细胞悬浮液与光源之间的距离恒定,才能保持统一。当然,这个距离与放入皮氏培养皿中细胞悬浮液的量可能是难以维持恒定的一个因素,这也是很清楚的。放入和悬浮在给定体积的溶液中的细胞随着时间的推移开始沉淀到皮氏培养皿底部。因此,在紫外光照射的整个过程中,悬浮液中细胞的数目有减少的趋势。
按上述程序在皮氏培养皿中照射细胞悬浮液时产生的有关问题是,难以使细胞悬浮液中的所有细胞受到同等量的紫外线照射。部分原因是由于细胞悬浮液在皮氏培养皿中或多或少的滞流所致。于是,处在细胞悬浮液靠近紫外光源的表面的细胞,其受到的照射量与细胞悬浮液中下面的细胞不同。尽管上述诸文章中有一扁提到在照射过程中抖动皮氏培养皿,但该方法也不能完全有效地解决上述问题。
举例说,抖动无盖的皮氏培养皿使细胞活动,这会使细胞悬浮液的蒸发量增加。另一方面,在抖动之前将皮氏培养皿盖住并不是有效的解决办法,因为制造盖的材料会有影响,并明显减少细胞悬浮液所受到的照射量。因此,这需要一个很困难的定标过程。
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