[发明专利]由沙棘提取分离超氧物歧化酶工艺

说明书

本发明涉及一种由植物中提取分离其有效成份的一种方法，具体地说，提供了一种由沙棘（果）中提取分离其所含超氧物歧化酶（SOD）的工艺方法。这种提取技术也适于从其它植物，如山枣、山梨、山杏果、越桔果及果肉中提取SOD。

超氧物歧化酶（SOD），自70年代末被发现牛红细胞中存在之后，由于其广阔的应用前景，特别是在医学上已经证明，SOD对自身免疫性疾病、放射病、肺炎、骨髓损伤及治疗癌症均有一定效果，对它的研究引起人们极大的兴趣。同时，近几年的研究表明，SOD在生物界分布十分广泛，人体及几乎所有生物体内都含有不同类型的SOD，但是由于植物中所含的SOD的量极微，且随植物生长过程中各种逆境环境条件，SOD的量又在不断变化，所以实际上很难从其中提纯SOD。目前医学临床应用及理论研究所需SOD均来自人或动物的血液中提取分离而且由于动物血液中所含的SOD的量亦十分微少，提取工艺复杂，使SOD的价格非常高昂。

沙棘是一种多年生灌木，其果实沙棘果具有较丰富的营养价值，目前沙棘果主要作为制作饮料、食品、保健品或饲料添加剂的原料。本发明者们发现，沙棘果中除含有人体所需的多种氨基酸之外，其中尚含有较高的SOD。因此建立一套由沙棘果中提取分离SOD及其它有用营养成份的方法，无论从制备医药界极需的价昂制品SOD及对综合利用沙棘植物都将具有重要的意义和带来较大的经济效益。

本发明的目的就在于为从植物沙棘（果）中提取分离SOD提供一种制备方法，同时所提供的技术又可用于从其它含有SGD植物如山枣、山梨、山楂果中提取这种有效成份及其它复合营养成份。

本发明提供的技术由附图1沙棘提取分离SOD工艺流程图示出。图中：1、原料制浆提取;2、机械离心分离Ⅰ;3、有机溶剂离心分离Ⅱ;4、铵化分离;5、超滤浓缩;6、凝胶法精制;7、产品。具体地说本发明沙棘果提取分离SOD工艺方法是，首先将沙棘果原料精选、清洗、制成匀浆液，即完成原料制浆1工序，得后将浆液在-4～4℃低温下分别进行机械离心分离Ⅰ及加入有机溶剂进行2次离心分离Ⅱ，经分离Ⅱ得到上清液加入铵盐沉淀，再进行低温离心分离，得到沉积物，沉积物中含有SOD等有效成份完成SOD的粗提工序，即硫铵沉淀4工序得到粗品SOD混合物。在上述沉积物中加入调解溶剂调整其pH值呈弱碱性使沉积物溶解，其溶液经超滤膜分离器，使有效成份得到浓缩5，经过凝胶柱进行精制6，再经超滤浓缩后冷冻干燥即可得到沙棘SOD冻干粉产品7，即完成其制备过程。在上述制备工艺方法中，其特征在于1、原料制浆提取工序是在弱碱性条件下进行的，pH值控制在7～9;2、有机溶剂分离过程3所用的有机溶剂可选用氯仿-乙醇混合溶剂，其乙醇的含量占溶剂的20～30%;3、铵化分离工序加入铵盐，如（NH₄）₂SO₄，其浓度为35～95%;4、氨化分离后的沉积物加入的调解溶剂一般可采用Na₂HPO₄溶液;5、凝胶法精制工序，其制备凝胶将采用SephadexG50～200凝胶柱。此外，上述工艺离心分离过程中，机械离心分离Ⅰ，有机溶剂离心分离Ⅱ中，其离心转数最好不低于4，000rpm;铵化分离过程其离心转数最好不低于5，000rpm，以保证分离产物充分被离心分离出来，提高制备过程的产品收率，另一方面，由于提取分离的SOD可能用以医药业、食品业，因此所选用的缓冲液最好采用磷酸缓冲溶液，例如NaH₂PO₄、KH₂PO₄等。下面通过实施例对本发明的技术给予进一步详细地说明。

实施例1，沙棘果提取分离SOD试验