[发明专利]鸡贫血病因子疫苗

说明书

本发明涉及一种保护禽类抵抗鸡贫血病因子(CAA)的，既可是活，也可是失活的疫苗、一种制备这种疫苗的方法、一种制备CAA病毒产物的方法，以及涉及一种微生物纯的CAA病毒组合物。

鸡贫血病因子(CAA)是鸟类有传染性的贫血病病原体，于1979年首次被Yuasa等人描述过(Avian Diseases 23，366-385，1979)。

在幼小的易感病的鸡体中CAA造成带有骨髓发育不全/再生不良和胸腺萎缩病状的贫血病。鸡长到一定年龄就能抵御实验诱发的，因CAA引起的病。对两周龄的鸟基本上是这样的，但对更大龄的鸟来说仍易被感染(Yuasa，N.et al.，1979 supra；Yuasa，N.etal.，Avian Diseases 24，202-209，1980)。然而如果用CAA和免疫抑制因子(如IBDV，MDV等)使鸡双重感染，则抗疾病的年龄就会被推迟(Yuasa，N.et，al.，1979 and 1980 supra；Bulowvon V et al.，J，Veterinary Medicine 33，93-116，1986)。接种CAA的鸡的发病风险率和死亡率与接种所用的CAA的剂量关系极大，即剂量越大疾病越严重(Yuasa，N.et al.，1979 supra)。

在标准培养成的，由各种鸡和鸡的胚胎组组产生的单层细胞中，如鸡胚胎脑细胞、鸡胚胎肝细胞和自肾、胸腺、Bursa of Fabricius(囊组织)、骨髓产生的鸡细胞或白血细胞产生的鸡细胞中CAA不生长(Yuasa，N.et al.，1979 supra；Yuasa，N.Natl.Inst.Anim.Health Q，23，13-20，1989)，而且在常用的各种哺乳动物细胞系，如VERO、CRFK，MDCK和A-72中也不生长(Rosenberger，J.K.and Cloud，S.S.，Avian Diseasea 33，707-713，1989)。

CAA在某些由Marek的病和淋巴白细胞淋巴瘤确定的淋巴细胞株中，尤其是有MDCC-MSBI细胞培养物中生长(Yuasa，N.，1983)。然而不利的是CAA在MDCC-MSBI细胞中只长到较低的滴定度。在MDCC-MSBI细胞中只得到10^5.0-10^6.0TCID₅₀/0.1ml的滴定度。另外发现，在MDCC-MSBI细胞中增殖的CAA仅为接种剂量的大约10倍(Yuasa，N.，1983 supra，Bülow von，V.et al.，ZentralblattVet.Med.32，679-693，1985)。

除鸡之外，CAA还可在鸡胚胎中繁殖(Yuasa，N.and Yoshida，I.，Natl.Inst.Anim.Health Q.23，99-100，1983；Bülowvon，V.and Witt，M.，J，Vet，Med.33，664-659，1986)。然而，在这些胚胎中见不到致死的或病理学的影响，这表明在含胚蛋中CAA不会繁殖得大到足以影响胚胎的量。当在MDCC-MSBI细胞中分析时，能从整个胚胎中得到的CAA的最高滴定值的变化范围在10^5.4-10^6.5TCID₅₀/ml之间，该值等于自实验感染的鸡肝提取物所得的滴定值。

Bülow von，V和Witt研究了作为产生可被施于亲本原种而无需减弱病毒毒性的活疫苗手段的在含胚蛋中有毒性的CAA的繁殖。然而在此要提到的是：必须防止减弱病毒毒性，因为这会导致丧失免疫性(Bülow von，V.and Fuchs，B.，J，Vet.Med.33，568-573，1986)。

Bulow和Fuchs，(J.Vet.Med.33，568-573，1986)曾报导过：经在MDCC-MSBI细胞中的连续次传代后，CAA病毒株Cux-1的致病力被降低了，然而其中并未公开与这些减小致病力的病毒株的免疫力相关的数据。事实上，Bulow和Fuchs，予料到随着这种致病力的降低免疫力也会降低的。

Yuasa(1983 Supra)或Goryo等人(Avian Pathology 16，149-163，1987)或Otaki等人(Avian Pathology 17，333-347，1988)都未发现一点儿在MDCC-MSBI细胞上Gifu-1株、TK-5803株以及CAA82-2株分别经19、40和40传代后减弱毒性的证据。