[发明专利]人体免疫缺陷病毒抗原

权利要求书

1、一种基本纯的HIV抗原，该抗原包含Gag-Env融合蛋白，其中所说的Gag-Env融合蛋白是由以羧基末端融合在Env肽上的Gag肽组成的，

所说的Gag肽包含Gag(308-437)所代表氨基酸序列中的至少10个相邻排列的氨基酸序列，其中括号内的每一数值均系图1-(1)至1-(2)所示Gag蛋白完整氨基酸序列中的氨基酸位置编号，

所说的Env肽包含至少一部分Env(512-699)所代表的氨基酸序列，所说的部分包括至少一个对HIV抗体有反应的表位，其中括号内的每一数值均为图2-(1)至2-(3)所示Env蛋白完整氨基酸序列中的氨基酸位置编号。

2、根据权利要求1的HIV抗原，其中在所说部分Env肽中包含的表位是Env（512-699）所代表的氨基酸序列中的至少5个相邻排列的氨基酸序列。

3、一种HIV抗原，该抗原包括权利要求1的HIV抗原与含Gag（1-500）所代表的氨基酸序列的Gag蛋白的混合物，所说的氨基酸序列为图1-（1）至1-（2）所示的Gag蛋白的氨基酸序列，其中括号内的每一数值均为图1-（1）至1-（2）中的氨基酸的位置编号。

4、一种基本纯的HIV抗原，该抗原包括以基本分离形式存在的含Gag（1-500）所代表氨基酸序列的Gag蛋白，所说的氨基酸序列为图1-（1）至1-（2）所示Gag蛋白的完整氨基酸序列，其中括号内的每一数值均为图1-（1）至1-（2）中氨基酸的位置编号。

5、一种生产基本纯的含Gag-Env融合蛋白的HIV抗原的方法，其中所说的Gag-Env融合蛋白是由以羧基末端融合在Env肽上的Gag肽组成的，该方法包括：

（a）将第一个脱氧核糖核苷酸序列连接到可复制的表达媒介上以获得能够在宿主细胞中复制的第一个重组DNA分子，该分子包含所说的表达媒介和插入在该媒介上的所说的第一个脱氧核糖核苷酸序列，

所说的第一个脱氧核糖核苷酸序列负责编码含有Gag（308-437）所代表的氨基酸序列中的至少10个相邻排列的氨基酸序列的Gag肽，其中括号内的每一数值均为图1-（1）至1-（2）所示Gag蛋白完整氨基酸序列中的氨基酸位置编号;

（b）把第二个脱氧核糖核苷酸序列连接到所说的第一个重组DNA分子上的第一个脱氧核糖核苷酸序列的下游，使所说的第二个序列融合到所说的第一个序列上，

所说的第二个脱氧核糖核苷酸序列负责编码含有至少一部分Env（512-699）所代表氨基酸序列的Env肽，所说的部分包括至少一个对HIV抗体有反应的表位，其中括号内的每一数值均为图2-（1）至2-（3）所示Env蛋白完整氨基酸序列中的氨基酸位置编号，

由此获得第二个能在宿主细胞中复制的重组DNA分子，该分子包含所说的表达媒介，所说的第一个脱氧核糖核苷酸序列以及融合在该序列下游的第二个脱氧核糖核苷酸序列;

（c）用所说的第二个重组DNA分子转化原核细胞或真核细胞以制备成转化体;

（d）从未转化的原核细胞和真核细胞中选择出转化体;

（e）培养转化体以生产含有Gag-Env融合蛋白的HIV抗原，其中所说的Gag-Env融合蛋白是由以羧基末端融合在所说的Env肽上的Gag肽组成的;

（f）从所培养的转化体中分离出所说的含Gag-Env融合蛋白的HIV抗原。

6、根据权利要求5的方法，其中所说的第二个脱氧核糖核苷酸序列负责编码Env（512-699）代表的氨基酸序列中的至少5个相邻排列的氨基酸序列。

7、根据权利要求5或6的方法，其中所说的表达媒介是由pT7系列或pUR290系列媒介得到的。

8、根据权利要求7的方法，其中所说的由pT7系列得到的表达媒介是pT7-7。