[发明专利]提取绒毛膜促性腺激素的方法

权利要求书

1、一种提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于：

a、原料为人工流产血清和绒毛组织；

b、逐级层析法提取绒毛膜促性腺激素，首先用排阻层析法选出富含绒毛膜促性腺激素段的流出液，再经阳离子层析、阴离子层析、纯化而制得纯品。

2、根据权利要求1所述的提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于排阻层析法其分子筛材料用琼脂糖凝胶类或葡聚糖凝胶类树脂。

3、根据权利要求1或2所述的提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于排阻层析流动相为低浓度氧化钠和纯水交替使用，无菌血清上样与床体积比为15-25%，用紫外监测仪收集富含绒毛膜促性腺激素的流出液。

4、根据权利要求1所述的提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于阳离子层析是把由排阻后富含绒毛膜促性腺激素的流出液用甲酸缓冲液调至PH为3.3，再通入阳离子层析柱，使PI＞3.3的杂蛋白和阳离子层柱反应，并把这部分蛋白留在柱内，流出液是富含绒毛膜促性腺激素及PI＜3.3的杂蛋白混合胶体液。

5、根据权利要求1所述的提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于阴离子层析是将从阳离子层析柱中流出的胶体液用甲酸缓冲液调至PH2.9-3.1，再通入阴离子层析柱使PH＜3.0的杂蛋白被吸附，流出液即为绒毛膜促性腺激素粗品。

6、根据权利要求1或2所述的提取绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于纯化是将绒毛膜促性激素粗品液用碱性液调PH至7.5-8.5，扩大绒毛膜促性腺激素杂与蛋白间的静电荷差，再通入阴离子层析柱使其与之反应，置于紫外自动监测仪上，用低盐溶液或纯水洗净非特异吸附的蛋白，待基线平稳后用梯度洗脱液Na₂HPO₄-NaH₂PO₄-H₃PO₄系，PH为7.5-8.5设计梯度洗脱，在紫外监测仪下收集绒毛膜促性腺激素的峰段即为纯品。