[发明专利]多特异性抗肿瘤免疫核糖核酸注射液及制备方法

说明书

本发明涉及一种多特异性抗肿瘤免疫核糖核酸注射液及制备方法。

目前，影响肿瘤患者治愈的一个重要原因是常规治疗（手术、化疗、放疗）后，部分患者出现肿瘤复发和转移。故此，控制和减少复发和转移，是提高肿瘤患者治愈率及生存期的重要途径之一。由于抗肿瘤免疫核糖核酸具有传递特异性和非特异性抗肿瘤免疫作用，故此，可以减少和控制肿瘤的复发和转移，提高肿瘤患者的治愈率和延长肿瘤患者的生存期，并且对癌前变，肿瘤易发人群起预防作用。目前，正在研究开发的一般是单纯特异性抗肿瘤免疫核糖核酸（即只针对某一种肿瘤有特异性作用的）。由于单纯特异性和非特异性抗肿瘤免疫核糖核酸作用单一，因此在临床上有一定的局限性。

本发明的目的就是为肿瘤患者及肿瘤易发人群提供一种多特异性抗肿瘤免疫核糖核酸注射液及制备方法。本发明可使机体建立或提高特异性和非特异性抗多种肿瘤的免疫反应能力，即在治疗某一种肿瘤的同时，可使机体建立起对其它多种肿瘤的特异性免疫反应，通过提高自身的抗肿瘤能力，消灭或控制常规治疗后残余癌细胞和新生的微小肿瘤病灶，达到治疗和预防的双重目的。

本发明的目的是通过以下措施达到的。多特异性抗肿瘤免疫核糖核酸注射液及制备方法，其特征在于每毫升注射液中含有：

免疫核糖核酸        1-5mg

肝素钠        200-500单位

生理盐水        1ml

其制备方法为：

a、将制备好的多特异性瘤苗免疫动物（如马、牛、羊等），然后采取其淋巴结、肝脏、脾脏进行匀浆、离心、提取、除蛋白、沉淀、除糖元、精制、洗涤、溶解过滤、测定含量，制成一定的剂型;

b、将制备好的多种单特异性瘤苗分别按上述a中所述制备方法制成各种单纯特异性抗肿瘤免疫核糖核酸，然后将其等量混合后，灌封，制成一定的剂型。

上述多特异性瘤苗的制备、是取多种人肿瘤手术组织，分别去包膜和坏死组织，剪碎，按重量等量混合，置40-120目网上，压磨肿瘤块，分离出单个肿瘤细胞，滤液用1000-1200rpm离心10-20分钟，弃上清，沉淀混悬于生理盐水中，其比值为1∶1（W/V），加入10-15%灭菌甘油，分装后置-20--40℃保存备用。

上述多特异性瘤苗的制备，还可以是取多种人癌细胞培养株，分别培养、收集细胞、计数后，以相同的细胞数将各种细胞株混合，1000-1200rpm离心10-20分钟，弃上清，沉淀用生理盐水混悬，其比值为1∶1（W/V），加入10-15%灭菌甘油，分装后置-20--40℃保存备用。

上述单特异性瘤苗的制备，是取单纯某一种人肿瘤手术组织，去包膜和坏死组织，剪碎，置40-120目网上，压磨肿瘤块，分离出单个肿瘤细胞，滤液用1000-1200rpm离心10-20分钟，弃上清，沉淀混悬于生理盐水中，其比值为1∶1（W/V），加入10-15%灭菌甘油，分装后置-20--40℃保存备用。

上述单特异性瘤苗的制备，还可以是取单纯某一种人癌细胞培养株，培养，收集细胞，计数后，1000-1200rpm离心10-20分钟，弃上清，沉淀混悬于生理盐水中，其比值为1∶1（W/V），加入10-15%灭菌甘油，分装后置-20--40℃保存备用。

本发明注射液的剂型可以是水针剂或冻干制品。

本发明多特异性抗肿瘤免疫核糖核酸，是指对多种不同肿瘤均具有特异性免疫作用。单特异性抗肿瘤免疫核糖核酸，是指只针对某一种肿瘤具有特异性免疫作用。

实施例1

1、多特异性瘤苗的制备：

将手术切除的人不同肿瘤组织，分别去包膜和坏死组织，剪碎成小块，按重量等量混合，置120目不锈钢网上，用硬橡皮塞轻轻压磨肿瘤块，分离出单个肿瘤细胞。滤液用1000-1200rpm离心10-20分钟，弃上清，沉淀混悬于生理盐水中，其比值为1∶1（W/V），加入10-15%灭菌甘油，分装后置-20--40℃保存备用。

2、原料制备：

动物选择1-1.5岁的经检疫的健康雄性绵羊。