[发明专利]颜色标志的家禽失活疫苗

说明书

本发明涉及了用特殊染料着色的家禽用颜色标志的各种失活疫苗（病毒、细菌性的或其它的）。

我们从以色列专利46189说明书中了解到用特殊染料着色的家禽颜色标志的活疫苗。该说明书也介绍了用染料着色病毒疫苗的应用及其优点。

使用活疫苗不一定总会令人满意，而使用失活疫苗往往会更有利特别是有以下的好处：

a/不存在减毒活性疫苗中可能发生的回复突变的危险和b/与活疫苗的一定程度的致病性（接种疫苗的反应或副作用）相比，没有致病性的危险。

可使用水溶液形式的活性疫苗。这种水溶液很容易着色，而且在水中的染料浓度只需要很少一点染料，例如低到0.002mg%。

失活疫苗通常呈油包水（W/O）乳液的形式。就此范围来说，用于使活疫苗着色的染料在所说的W/O乳液中无效。这个预料结果也是根据到目前为止不知道着色失活疫苗的事实。

令人惊奇的是已经发现，如果把水相中的染料浓度提高到至少0.5mg%的话，那么就能使该乳液着色，并能在与着色活疫苗相同的方式下来使用。最终乳液中染料浓度为0.05mg%或更多。

这样，本发明的要点是以油包水乳液的颜色标志家禽失活疫苗，其中水相用有区别的染料着色，乳液中染料浓度至少为0.05mg%。

使用乳液还有以下个优点：

a/由于乳液的油部分的辅助作用，使免疫作用程度更高，而且b/诱导长期和均匀免疫作用。该W/O乳液宜于由水相、油相和乳化剂组成，其中水相是由水、盐水、缓冲剂（例如磷酸盐缓冲盐水）或其它类接种溶液所组成，油相是由矿物油（例如Drakeol或其它各种长链碳氢化合物构成的油），或植物油（例如芝麻油、花生油、玉米油等等）组成的;水相的乳化剂是例如吐温40、60、80等、（聚氧化乙烯脱水山梨糖醇的单棕榈酸酯、单硬酯酸酯、单油酸酯等），作为油相的乳化剂是例如，甘露糖醇单油酸酯（Arlacel        A）Arlacel80等（脱水山梨糖醇单硬酯酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二缩甘露醇单油酸酯等）。

合适的染料有，例如下表中列出的那些

名称        类似物和品种

日落黄        C.I.食品黄3;F.D.和V.C.黄第6号

亮蓝        C.I.食品蓝2;F.D.和V.C.蓝第1号

亮蓝FCF

草绿

丽春红4R        C.I.食品红7;胭脂红        Nonvelle，

胭脂红A，E124

偶氮玉红        C.I.食品红3;蓝光酸性红，E-122。

以及上面各种染料所有的组合物，或其它安全食品色素，或制药业中使用的这类色素。

乳化液当中的染料浓度按染料颜色而变化。因此，乳化液中染料最低浓度，例如红、绿、黄乳化液的浓度分别为0.05，0.5或0.25mg%。

现在参照下面的实例来说明本发明，但发明不受这些实例的限制。

实例1

把100g日落黄粉末溶于1升的重蒸馏水中制成日落黄着色液。再将着色液分装入几个瓶内，用橡胶塞塞紧，铝密封封好。在121℃下，高压灭菌20分钟，冷却后进行灭菌检验。在制备失活的新城鸡瘟疫苗（Nectin）的过程中，将灭菌液按0.6%的浓度加到含有新城鸡瘟病毒的西蜀菌株（Komarov        strain）的氨水-尿囊酸（alantoic）液体（AAF）。

把含病毒的染色溶液和吐温80乳化剂一起在有高速搅拌器（Silverson型）搅拌的同时，缓缓地加到含甘露糖醇单油酸酯（Arlacel        A）的矿物油中。

通过给4周大的鸡肌肉注射（i.m.）0.5ml剂量的所制疫苗，并在3周后利用血细胞凝集抑制法（H.I.）试验鸡血清中的抗体浓度，把常规的“Nectin”乳液和有色“Nectin”乳液作一比较。

结果是：

HI值(Log₂) HI平均值(Log₂)

常规"Nectin"        1×6、2×7、7×8        7.6±0.7

黄色"Nectin"        1×7、9×8        7.9±0.3

未免疫处理对照        5×4、2×5、1×6        4.5±0.8

乳液稳定性：在4℃下贮存1年半，着色的和常规的疫苗之间未见差别。

实例2