[发明专利]检测用癌试剂的制备方法无效
申请号: | 93105929.1 | 申请日: | 1993-05-17 |
公开(公告)号: | CN1064083C | 公开(公告)日: | 2001-04-04 |
发明(设计)人: | 刘景田;党小军;张洁;李月华;郭珍 | 申请(专利权)人: | 刘景田 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12N5/06 |
代理公司: | 西安市专利事务所 | 代理人: | 蔡聿鸿 |
地址: | 710068 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 试剂 制备 方法 | ||
1、一种检测用癌试剂的制备方法,其特征在于:使用目前国际公认的小鼠肉瘤细胞传代小鼠腹水中取出的S180癌细胞,经生理盐水稀释后注入昆明小鼠腹腔内培养10天,然后抽出昆明小鼠的腹水,加入肝素抗凝剂,用离心法去掉腹水,将培养成的S180癌细胞用浓度5%的小牛血清Hank′s液洗涤3次,除去S180癌细胞表面的分泌物,然后加入抑癌药物丝裂霉素,在37℃维持30分钟进行灭活,再用浓度5%的小牛血清Hank′s液洗涤2次,将得到的经灭活处理的S180癌细胞分别用下述两种方法制得供检测用的S180癌细胞未致敏试剂:
①将经灭活控制处理的S180癌细胞用140μ/ml肝素抗凝,再用含10%小牛血清Hank′s液配成1×107/ml,加等量1640细胞培养液和8倍保护剂及赋形剂脱脂牛乳,再加防腐剂,每毫升青霉素100单位,链霉素0.1mg,制成未致敏悬液试剂,
②将①制得的悬液试剂,经-40℃冷冻处理2小时,在0.03托真空状态下,37℃加热13~14小时,使水份小于1%,进行真空灌封,制得未致敏冻干试剂成品。
2、如权利要求1所述的检测用癌试剂的制备方法,其特征在于:所述的经灭活控制处理的S180癌细胞可用140μ/ml肝素抗凝,再用含10%的小牛血清Hank′s液配成1×107浓度,加等量新鲜豚鼠血清,37℃孵育30′,2000rpm-5min洗3次,恢复原体积,加等量1640细胞培养液、8倍保护剂及赋形剂脱脂牛乳,制成致敏冻干试剂成品。
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